更新時(shí)間:2024-12-01
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實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR
產(chǎn)品名稱 | 連翅探針法PCR鑒定試劑盒直銷 |
英文名稱 | forsythiae |
貨號(hào) | BH-P99279 |
產(chǎn)品及特點(diǎn):
本產(chǎn)品包含Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應(yīng)緩沖液,濃度為2×。具有快速簡便、靈敏度高、特異性強(qiáng)、穩(wěn)定性好等優(yōu)點(diǎn),可大限度的減少人為誤差。使用時(shí)只需加入DNA模板和引物既可。使用方便快捷,能避免PCR操作過程中的污染,使用時(shí)只需取適量2×TaqPCR MasterMix溶液,加入模板和引物,并加入去離子水補(bǔ)足體積,使MasterMix溶液濃度為1×即可進(jìn)行反應(yīng)。使用前請(qǐng)保證充分溶解并混勻,操作需在冰上進(jìn)行。本產(chǎn)品就是為此目的根據(jù) PCR 原理開發(fā)的試劑盒。
具有高靈敏度、高特異性、高穩(wěn)定性
可在同一個(gè)管子中高特異性的執(zhí)行cDNA合成與基于探針的qPCR反應(yīng)。更多優(yōu)點(diǎn)如1.的特異性;2.多重反應(yīng)(高通量);3.反應(yīng)體系配置,無需冰塊;4.無懼高GC含量PCR;5.預(yù)防交叉污染;6.廣泛的設(shè)備兼容性。
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KMY0922 人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL特比萘芬-d7鹽酸鹽Terbinafine-d7 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
小鼠腎集合管細(xì)胞(SV40轉(zhuǎn)化);M-1羥基特比萘芬Hydroxy Terbinafine質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
C10ORF54 Others Human 人 B7-H5 / Gi24 / VISTA 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 羥基特比萘芬β-D-葡萄糖苷酸Hydroxy Terbinafine β-D-Glucuronide質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
U-87 MG人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤 U-87 MG of brain asocytic blastoma DMEM+10% FBSThymopentin質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
SF767細(xì)胞,人腦瘤細(xì)胞 陰溝腸桿菌 人主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞總RNAHAEC NA1酸鹽Tilmicosin phosphate salt質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
ICAM2 Others Mouse 小鼠 ICAM2 / CD102 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) N-亞硝基-N-甲基尿烷(>95.0%(GC))N-Methyl-N-nitrosourethane質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)
人T瘤轉(zhuǎn)基因細(xì)胞;Jurkat D,EMUG;4-甲基傘型酮-beta-D-葡糖苷酸4-MUG質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
TCH1 Others Mouse 小鼠 tch-1 / TCH1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) Mixidil質(zhì)量規(guī)格:>98%
CM-R030大鼠腸粘膜上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL(標(biāo)準(zhǔn)品)Mixidil質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
MCF-7 [MCF7], 人癌細(xì)胞系 牛胚氣管細(xì)胞,EB細(xì)胞 Hs 578T(人成纖維細(xì)胞)(硫酸鹽)敏樂啶Mixidil Sulfate質(zhì)量規(guī)格:>99.0%
獼猴皮膚細(xì)胞;MMS7 人胚胎性癌細(xì)胞,Cates-1B細(xì)胞 MDA-MB-453(癌細(xì)胞)原質(zhì)量規(guī)格:BCTrypsigen >2500U/mg from bovine pancreas
人Butt瘤細(xì)胞;RAJI色胺(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRTryptamine
ICOS Others Human 人 ICOS / AILIM / CD278 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 三氧化鎢(>99%,BC)質(zhì)量規(guī)格:>99%,BCTungsten (VI) oxide
造骨細(xì)胞生長添加物ObGS碳化鎢200(>99%,BC)質(zhì)量規(guī)格:>99%,BCTungsten carbide-200
TNFRSF13B Others Human 人 TNFRSF13B / TACI / CD267 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 羧酸質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Celecoxib Carboxylic Acid
連翅探針法PCR鑒定試劑盒直銷CD80 Others Human 人 B7-1 / CD80 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) DHA脫氫醋酸10克BR
人口腔角質(zhì)細(xì)胞裂解物HOKL鹽酸環(huán)胞苷 Ancitabine 10212-25-6 1G 通用試劑
IGFBP6 Others Human 人 IGFBP6 / IBP-6 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 六拂鱗醋 Hqxcfluorophosphoric ccid;
BRL-3A 大鼠正常肝細(xì)胞dTTP(2'-DEOXYTHYMIDINE-5'-TRIPHOSPHATE)TRIwo7iu