更新時間:2024-11-29
灸甘草探針法PCR鑒定試劑盒保存公司相關(guān)產(chǎn)品 Demethylwedelolactone 異去甲蟛蜞菊內(nèi)酯 Demethylwedelolactone 6468-55-9 分子式:C15H8O7 分子量:300.22小白菊內(nèi)酯 Parthenolide 小白菊內(nèi)酯 Parthenolide 20554-84-1 分子式:C15H20O3 分子量:248.32五味子甲
儲存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
產(chǎn)品名稱 | 灸甘草探針法PCR鑒定試劑盒保存 |
英文名稱 | glycyrrhizae preparata |
貨號 | BH-P99660 |
特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)地黃保守序列設(shè)計的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。
6. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照《食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗阪崎腸桿菌檢驗要求進行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
注:上述樣品建議經(jīng)過增菌后,收集培養(yǎng)物用于檢測。
二、DNA提?。?/span>
可采用PCR試劑盒配備的DNA抽提液,按以下說明進行DNA核酸的粗提。也可采購上海澤葉生物科技有限公司生產(chǎn)的DNA提取試劑盒(過柱法-熒光配套)或其他合適的商業(yè)化產(chǎn)品,并按照相應(yīng)試劑盒說明進行操作。
1、液體培養(yǎng)物:取液體培養(yǎng)物100μL加到1.5mL無菌離心管中,8000rpm離心3min,盡量吸棄上清,加入50μL DNA抽提液充分混勻,100℃恒溫10min,13000rpm離心3min,取上清5μL進行PCR反應(yīng)。
2、固體培養(yǎng)物:挑取單克隆菌落與50μL DNA抽提液充分混勻,100℃恒溫10min,13000rpm離心3min,取上清5μL進行PCR反應(yīng)。
3、糞便樣品:挑取米粒大小糞便于滅菌離心管中,加入0.5mL生理鹽水,振蕩混勻,13000rpm離心3分鐘,棄上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻,100℃恒溫10min,13000rpm離心3min取上清5μL進行PCR反應(yīng)。
4、其他液體標本:取標本2-3mL,13000rpm離心3min,棄上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻,100℃恒溫10min,13000rpm離心3min取上清5μL進行PCR反應(yīng)。
注:陽性對照和陰性對照為已經(jīng)抽提好的核酸(無需提取),直接取5μL加入到反應(yīng)體系中即可。由于陽性對照濃度較高,建議在樣品制備區(qū)域加入陽性對照。
豚鼠胚胎細胞;104C1綠麥隆標準溶液(100μg/ml,u=4%)Chlortoluron solution質(zhì)量規(guī)格:100μg/ml,u=4%
AsPc-1細胞,人轉(zhuǎn)移胰腺癌細胞 人正常皮膚細胞,HaCaT細胞 小鼠T細胞;Cl.Ly1+2-/9敵草隆(99%)Diuron質(zhì)量規(guī)格:0.99
HSC-T6(大鼠肝星形細胞) 5×106cells/瓶×2四螨嗪(分析標準品,98.6%)Clofentezine質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,98.6%
Gibco 17101015 Collagenase Type II 1g非草隆(標準品)Fenuron質(zhì)量規(guī)格:分析標準品
人心肌細胞-心室cDNAHCF-av cDNA丁(B9)(標準品)Damizide質(zhì)量規(guī)格:分析標準品
KYSE150 食管鱗癌西米替?。藴势罚┵|(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品Cimetidine
ME-180人頸表皮癌細胞 ME-180 human cervical epidermoid carcima cells McCOY's 5A+10%FBS阿德福韋/阿德福韋酯質(zhì)量規(guī)格:>99%,可用于細胞培養(yǎng)Adefovir dipivoxil
HGF Protein Rat 重組大鼠 HGF / Hepatocyte Growth Factor 蛋白質(zhì)量規(guī)格:>94%,BSIndocyanine Green
小鼠海馬趾星形膠質(zhì)細胞(MA-h)(5×105) kasumi-1, 人白血病細胞株 Human靛藍質(zhì)量規(guī)格:BSIndigotin
大鼠腎小管上皮細胞RRTEpiC甲基藍質(zhì)量規(guī)格:ARMethyl blue
HRG Others Human 人 HPRG / HRG 人細胞裂解液 (陽性對照) 琥乙(標準品)質(zhì)量規(guī)格:雜質(zhì)檢查Erythromycin ethylsuccinate
BPH-1, 人前列腺增生細胞(標準品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Griseofulvin
FSTL5 Others Human 人 FSTL5 人細胞裂解液 (陽性對照) Tivantinib(ARQ197)質(zhì)量規(guī)格:>98%,c-Met抑制劑Tivantinib, ARQ 197
人胚腎細胞;293FT3-乙氧基-4-羥基苯(標準品)質(zhì)量規(guī)格:系統(tǒng)適應(yīng)性Ethyl vanillin
豹貓肺成纖維樣細胞;LCL4 幼倉鼠腎細胞,BHK細胞 DCS細胞,小鼠樹突狀細胞肉瘤細胞鹽酸奈福泮(標準品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Nefopam HCl
灸甘草探針法PCR鑒定試劑盒保存人胚胎心臟成纖維樣細胞;HEH2酸500克
IL20RB Others Rat 大鼠 IL20RB 人細胞裂解液 (陽性對照) 2-(2-羌基本基)本并惡坐 2-(2-xy7XYPHqNYL)BqNZOXcZOLq 832-64-3
人腎皮層上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL氫氧化鎘100毫克
B16-Fo細胞,鼠色素瘤細胞系 WI-38(胚肺細胞) 人晶體上皮細胞永生系;SRA01/04(HLE)1,4-雙(5-本基-2-噁唑基)本shēng huà shì jì容量:2.5升
CCL8 Protein M
實驗流程:
1. 整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。