更新時(shí)間:2024-12-05
NCI-H661[h661]人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:Phospho-FOXO1 + FOXO3 + FOXO4 (phospho T24 + T32): 0酸化叉頭蛋白家族抗體 T Others Human 人 ansthyretin / T / Prealbumin / PALB 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)Hep G2, 人肝癌細(xì)胞系 兔子白介素1可溶性受體I (IL-1sR Ⅰ)
公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
NCI-H661[h661]人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞 | 1×106 | P-X895 |
1、細(xì)胞傳代:
1)細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的 80%面積時(shí),棄 25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用 PBS 清洗細(xì)胞一次;
2)添加 0.25%消化液約 1ml 至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后加入 5ml 培養(yǎng)
液終止消化,再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至 15ml 離心管中,1000rpm 離心 5min;
3)棄上清,沉淀細(xì)胞用 1-2ml 培養(yǎng)基重懸,然后按 1:2 比例進(jìn)行分瓶傳代,最后放入 37℃,5%CO2細(xì)胞
培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
2、細(xì)胞凍存:
1)細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的 80%面積時(shí),棄 25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用 PBS 清洗細(xì)胞一次;
2)添加 0.25%消化液約 1ml 至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終
止消化,輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至 15ml 離心管中,1000rpm 離心 5min;
3)用適量的凍存液(FBS:DMSO=9 :1)重懸細(xì)胞,并放置于凍存管中;
4)先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃過夜,24h 后轉(zhuǎn)入液氮中進(jìn)行長期保存。使用程序
降溫盒可直接放入-80℃。
二、細(xì)胞培養(yǎng)操作
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10 cm皿中,加入約8 mL培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,使消化液浸潤所有細(xì)胞,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min(視細(xì)胞情況而定),然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中,1000 rpm離心5 min,棄去上清液,補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。
c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 3) 細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例;a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液,使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
三、培養(yǎng)注意事項(xiàng)
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時(shí)和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。
3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。
4. 貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞,再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?,個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時(shí)和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞 的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。
8. 備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請換用按照說明書細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。 收到細(xì)胞后第一次傳代建議 1:2 傳代 。
9. 注意: 1:2 傳代就是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè) T25 瓶或者 2 個(gè) 6cm 皿。不是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè)10cm 皿。
公司正在出售的產(chǎn)品:
CL-0353hFOB 1.19(SV40轉(zhuǎn)染人成骨細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 大鼠細(xì)氧化酶(COX)ELISA試劑盒 E2 雌二醇 96T
MCT2: 單羧酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體 小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-A2
NCI-H446(人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 COLO 205(結(jié)腸癌細(xì)胞) 大鼠細(xì)(Cyt-C)ELISA試劑盒 ET3 游離狀腺原酸T3 96T
MDH1: 可溶性蘋果酸脫氫酶抗體 大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞;IEC-6
IL1B Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IL-1 beta / IL1B 蛋白 大鼠細(xì)(Cyt-C)ELISA 試劑盒 ALDH 大鼠乙醛脫氫酶 96T
HPV18 E6 protein: 人類狀瘤病毒18 E6單克隆抗體 CM-M026小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基100mL
GNM細(xì)胞,上頜牙齦癌頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移癌 宋氏志賀氏菌 人APP-PS1(M146L)雙基因轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞株;7WML6.0 人單核細(xì)胞增多性李斯特菌素(listeriolysin)ELISA 試劑盒 HMGA2 (high mobility group A2) 高遷移率族蛋白A2抗原 0.5mg
hnRNP F: 異質(zhì)核糖核蛋白F抗體 CD36 Others Mouse 小鼠 CD36 / GP3B / SCARB3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
大鼠骨髓瘤細(xì)胞;IR983F 人單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA 試劑盒 HO-1/HSP32 (Hemeo xygenase 1) 血紅素氧合酶-1/熱休克蛋白-32抗原 0.5mg
hnRNP K: 異質(zhì)核糖核蛋白K抗體 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0909
NCI-H661[h661]人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞P2Y8: G蛋白偶聯(lián)受體p2y8抗體 IL18BP Others Human 人 IL18BPa 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
人胚腎細(xì)胞;293 [HEK-293] 大鼠低密度脂蛋白免疫復(fù)合物(LDL-IC)ELISA試劑盒 Cys-C(Human Cystatin C) 人半胱酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C 96T
P2Y9: G蛋白偶聯(lián)受體p2y9抗體 非洲綠猴腎細(xì)胞;CV-1
人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細(xì)胞;NK-92MI [NK92MI] 人前列腺成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 大鼠低密度脂蛋白免疫復(fù)合物(LDL-IC)ELISA 試劑盒 AChRab(Human acetylcholine receptor antibody) 人乙酰受體抗體 食管上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
人臍靜脈平滑肌細(xì)胞 大鼠低密度脂蛋白(LDL-C)ELISA試劑盒 5-HT(Human 5-Hydroxytryptamine) 人5羥色胺 96T