蛋白質(zhì)通過鹽析的辦法沉淀的原理是降低蛋白質(zhì)的溶解度,使蛋白質(zhì)凝聚而從溶液中析出。蛋白質(zhì)的沉淀(protein precipitation)是溶液中的溶質(zhì)由液相變成固相析出的過程。蛋白質(zhì)從溶液中析出的現(xiàn)象,稱為蛋白質(zhì)的沉淀。蛋白質(zhì)沉淀常用的方法有鹽析、等電點沉淀、有機溶劑沉淀、生物堿試劑與某些酸沉淀等。在生化制備中,沉淀主要用于濃縮目的,或用于除去留在液相或沉淀在固相中的非必要成分。在生化制備中常用的有以下幾種沉淀方法和沉淀劑:
1.鹽析法
多用于各種蛋白質(zhì)和酶的分離純化。
2.有機溶劑沉淀法
多用于生物小分子、多糖及核酸產(chǎn)品的分離純化,有時也用于蛋白質(zhì)沉淀。
3.等電點沉淀法
用于氨基酸、蛋白質(zhì)及其它兩性物質(zhì)的沉淀。但此法單獨應(yīng)用較少,多與其它方法結(jié)合使用。
4.非離子多聚體沉淀法
用于分離生物大分子。
5.生成鹽復合物沉淀
用于多種化合物,特別是小分子物質(zhì)的沉淀。
6.熱變性及酸堿變性沉淀法
用于選擇性的除去某些不耐熱及在一定PH值下易變性的雜蛋白。