更新時間:2024-12-04
燈心草染料法PCR鑒定試劑盒*公司相關(guān)產(chǎn)品 Base 2′-脫氧胸苷-5′-二磷酸三鈉鹽95648-78-5 dTDP 類桿菌-膽汁-七葉苷(BBE)瓊脂 BBE Agar 2′-脫氧尿苷951-78-0 2′-dU 酪蛋白瓊脂 Casein Agar 2′-脫氧尿苷-5′-單磷酸二鈉鹽42155-08-8包裝 dUMP
儲存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
產(chǎn)品名稱 | 燈心草染料法PCR鑒定試劑盒* |
英文名稱 | Medulla junci |
貨號 | BH-P99494 |
特點(diǎn):
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)地黃保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。
6. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照《食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)阪崎腸桿菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
注:上述樣品建議經(jīng)過增菌后,收集培養(yǎng)物用于檢測。
二、DNA提取:
可采用PCR試劑盒配備的DNA抽提液,按以下說明進(jìn)行DNA核酸的粗提。也可采購上海澤葉生物科技有限公司生產(chǎn)的DNA提取試劑盒(過柱法-熒光配套)或其他合適的商業(yè)化產(chǎn)品,并按照相應(yīng)試劑盒說明進(jìn)行操作。
1、液體培養(yǎng)物:取液體培養(yǎng)物100μL加到1.5mL無菌離心管中,8000rpm離心3min,盡量吸棄上清,加入50μL DNA抽提液充分混勻,100℃恒溫10min,13000rpm離心3min,取上清5μL進(jìn)行PCR反應(yīng)。
2、固體培養(yǎng)物:挑取單克隆菌落與50μL DNA抽提液充分混勻,100℃恒溫10min,13000rpm離心3min,取上清5μL進(jìn)行PCR反應(yīng)。
3、糞便樣品:挑取米粒大小糞便于滅菌離心管中,加入0.5mL生理鹽水,振蕩混勻,13000rpm離心3分鐘,棄上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻,100℃恒溫10min,13000rpm離心3min取上清5μL進(jìn)行PCR反應(yīng)。
4、其他液體標(biāo)本:取標(biāo)本2-3mL,13000rpm離心3min,棄上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻,100℃恒溫10min,13000rpm離心3min取上清5μL進(jìn)行PCR反應(yīng)。
注:陽性對照和陰性對照為已經(jīng)抽提好的核酸(無需提取),直接取5μL加入到反應(yīng)體系中即可。由于陽性對照濃度較高,建議在樣品制備區(qū)域加入陽性對照。
腎皮層上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)去氧膽酸Deoxycholic acid質(zhì)量規(guī)格:>95.0%
NRG1 Others Human 人 NRG1-beta 1 (ECD) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) β-環(huán)糊精β-Cyclodextrin質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,藥用級
大鼠腎上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mLRamipril質(zhì)量規(guī)格:>98.0,BR
MR1 [derivative of HB-11048]中國倉鼠X小鼠B細(xì)胞雜交瘤 MR1 [derivative of HB-11048] Chinese hamster X mouse B lymphocyte hybridoma RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS(標(biāo)準(zhǔn)品)Ramipril質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98,標(biāo)準(zhǔn)品
IGFBP6 Protein Human 重組人 IGFBP6 / IBP-6 蛋白 (His 標(biāo)簽)質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
猴腎細(xì)胞;Vero IgCD4硫化鐵 (II)(>70%,BR)Iron (II) sulfide質(zhì)量規(guī)格:>70%,BR
NGFR Others Mouse 小鼠 NGFR / P75 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 四氧化三鐵(>98%,BR)Iron (II,III ) oxide質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
(含100mL酶解緩沖液) 10mL3-乙基-d5-腺嘌呤3-Ethyl-d5-adenine質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
HGC-27人胃癌細(xì)胞(未分化) HGC-27 human gasic carcima cells (undiffereiated) RPMI-1640(GIBCO)+20%FBS3-甲基-d3-腺嘌呤3-Methyl-d3-adenine質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
IL13 Protein Cymolgus 重組食蟹猴 IL13 / ALRH 蛋白 (His 標(biāo)簽)N1-氧基-腺嘌呤Adenine-N1-Oxide質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
OLR1 Others Rat 大鼠 OLR1 / LOX1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP 32,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)Spirolactone
神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)基NM-prf(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Spirolactone
SiHa細(xì)胞,人細(xì)胞 小鼠血細(xì)胞,WEHI-3細(xì)胞 成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)Azathioprine
Hela 299(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2鹽酸巴尼地平質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRBarnidipine HCl
hMNC-CB pooled Pellet 人類臍帶血單核細(xì)胞混合團(tuán)塊,超 > 1 mio.cells 人角膜上皮細(xì)胞總RNAHCEpiC NA鹽酸頭孢吡1 質(zhì)量規(guī)格:含量82.5%~91.1%(每毫克頭孢吡1含量,干品)Cefepime
燈心草染料法PCR鑒定試劑盒*NRK-52E 大鼠腎細(xì)胞單1酸鹽質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Acyclovir Mophosphate
大額牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;BOS-2-d4質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Acyclovir-d4
Caki-1, 人腎透明細(xì)胞癌皮膚轉(zhuǎn)移細(xì)胞N2-乙?;?/span>-9-(2-乙酰氧基乙氧基甲基)(雜質(zhì))質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口N2-Acetyl-9-(2-acetoxyethoxymethyl)guanine (Acyclovir Impurity)
人腦瘤細(xì)胞;SF763 大鼠頜下腺上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 1
實(shí)驗(yàn)流程:
1. 整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。