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白薇探針法PCR鑒定試劑盒保存

更新時間:2024-12-01

簡要描述:

白薇探針法PCR鑒定試劑盒保存公司相關(guān)產(chǎn)品
3-O-galloylmucic acid 3-O-沒食子酰粘酸 3-O-galloylmucic acid 143202-36-2 分子式:C13H14O12 分子量:362.24
五味子醇甲 Schisandrin 五味子醇甲 Schisandrin 7432-28-2 分子式:C24H32O7 分子量:432.51
柚皮

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儲存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

產(chǎn)品名稱

白薇探針法PCR鑒定試劑盒保存

英文名稱

cynanchi atrati

貨號

BH-P99624

特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)地黃保守序列設(shè)計的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。
6. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照《食品衛(wèi)生微生物學檢驗阪崎腸桿菌檢驗要求進行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,43,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
注:上述樣品建議經(jīng)過增菌后,收集培養(yǎng)物用于檢測。
二、DNA提取:
可采用PCR試劑盒配備的DNA抽提液,按以下說明進行DNA核酸的粗提。也可采購上海澤葉生物科技有限公司生產(chǎn)的DNA提取試劑盒(過柱法-熒光配套)或其他合適的商業(yè)化產(chǎn)品,并按照相應(yīng)試劑盒說明進行操作。
1、液體培養(yǎng)物:取液體培養(yǎng)物100μL加到1.5mL無菌離心管中,8000rpm離心3min,盡量吸棄上清,加入50μL DNA抽提液充分混勻,100恒溫10min,13000rpm離心3min,取上清5μL進行PCR反應(yīng)。
2、固體培養(yǎng)物:挑取單克隆菌落與50μL DNA抽提液充分混勻,100恒溫10min,13000rpm離心3min,取上清5μL進行PCR反應(yīng)。
3、糞便樣品:挑取米粒大小糞便于滅菌離心管中,加入0.5mL生理鹽水,振蕩混勻,13000rpm離心3分鐘,棄上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻,100恒溫10min,13000rpm離心3min取上清5μL進行PCR反應(yīng)。
4、其他液體標本:取標本2-3mL,13000rpm離心3min,棄上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻,100恒溫10min,13000rpm離心3min取上清5μL進行PCR反應(yīng)。
注:陽性對照和陰性對照為已經(jīng)抽提好的核酸(無需提取),直接取5μL加入到反應(yīng)體系中即可。由于陽性對照濃度較高,建議在樣品制備區(qū)域加入陽性對照。
BABL/C2 BABL/C小鼠胚胎細胞Meropenem trihydrate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR,三水合物

CL-0174NRK-52E(大鼠腎小管導管上皮細胞)5×106cells/瓶×2(標準品)Meropenem trihydrate質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品,三水合物

MEF, 小鼠胚胎成纖維細胞硫酸Kanamycin mo sulfate質(zhì)量規(guī)格:效價≥750IU/MG,BP,BR

人胚腎細胞-F克隆;293F 人腎成纖維細胞*培養(yǎng)基 100mL硫酸(標準品)Kanamycin mo sulfate質(zhì)量規(guī)格:效價測定

人羊膜上皮細胞RNAHAmEpiC miRNA5 μg1酸鹽Ketanserin Tartrate質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR
CL-0029B16(小鼠色素瘤細胞)5×106cells/瓶×21--4-(三氟甲氧基)(>97.0%(GC))1-Bromo-4-(trifluoromethoxy)benzene質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)

H4細胞,人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞 人大動脈平滑肌細胞,HASMC細胞 正常大鼠腎細胞(EGF受體陽性);NRK49F4-丁基-4'-羥基查耳酮(>98.0%(HPLC))4-Butyl-4'-hydroxychalcone質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)

BSC-1(猴腎細胞) 5×106cells/瓶×2(E)-4-羥基-N-去甲基它莫西芬(E)-4-Hydroxy-N-desmethyl Tamoxifen質(zhì)量規(guī)格:美國進口

COMP Others Human COMP 人細胞裂解液 (陽性對照) 4-乙酰氧基它莫西芬4-Acetoxy Tamoxifen質(zhì)量規(guī)格:美國進口

二氫還原酶缺陷型中國倉鼠卵巢細胞;CHO/dhFr-N-去甲基-4-羥基它莫西芬-d5 (1:1 E/Z 混合物)N-Desmethyl-4-hydroxy Tamoxifen-d5 (1:1 E/Z Mixture)質(zhì)量規(guī)格:美國進口
IL15 Protein Human 重組人 IL-15 / IL15 / Ierleukin 15 蛋白 (His 標簽)鹽酸尼非卡蘭質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRNifekalant

人小神經(jīng)膠質(zhì)細胞(HM) ( 5×105 ) 人海馬神經(jīng)元 Human鹽酸尼非卡蘭(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標準品Nifekalant

CM-H041人直腸粘膜上皮細胞*培養(yǎng)基100mL醋酸舍莫瑞林 質(zhì)量規(guī)格:≥98.0%Sermorelin Acetate

EPHA4 Others Cymolgus 食蟹猴 EphA4 人細胞裂解液 (陽性對照) 銀質(zhì)量規(guī)格:>98%,USP31,BRSilver Sulfadiazine

人神經(jīng)細胞HN(標準品)質(zhì)量規(guī)格:>98%,標準品Silver Sulfadiazine
白薇探針法PCR鑒定試劑盒保存表達SV40TEBNA1的人胚腎細胞;293ET 人腎上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL7,8-二氫生物蝶呤質(zhì)量規(guī)格:HPLC>95%,BR7,8-Dihydro-L-biopterin

人支氣管平滑肌細胞總RNAHBSMC NA整形素質(zhì)量規(guī)格:>90%,BRChlorflurel-methyl

小鼠雪旺細胞(MSC)(5×105)帕拉米韋三水合物質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRPeramivir Trihydrate

中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO 1beta9,12.5 Clone 36神經(jīng)保護劑NXY0
實驗流程:
1. 整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。

3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。

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