更新時間:2024-12-01
吳茱萸探針法PCR鑒定試劑盒說明書公司相關(guān)產(chǎn)品二氯熒光素76-54-0 Fluorescein dichloride 變形桿菌成套生化鑒定管(BXWS) BXWS 13種*1套/盒*10盒3',6'-二氯熒光素630-88-6 3',6'-Dichlorofluoran 創(chuàng)傷弧菌成套生化鑒定管 9種*2套/盒*5盒
實驗流程:
1. 整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。
產(chǎn)品名稱 | 吳茱萸探針法PCR鑒定試劑盒說明書 |
英文名稱 | evodiae |
貨號 | BH-P99273 |
特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)地黃保守序列設(shè)計的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。
6. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照《食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗阪崎腸桿菌檢驗要求進行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
注:上述樣品建議經(jīng)過增菌后,收集培養(yǎng)物用于檢測。
二、DNA提?。?/span>
可采用PCR試劑盒配備的DNA抽提液,按以下說明進行DNA核酸的粗提。也可采購上海澤葉生物科技有限公司生產(chǎn)的DNA提取試劑盒(過柱法-熒光配套)或其他合適的商業(yè)化產(chǎn)品,并按照相應(yīng)試劑盒說明進行操作。
1、液體培養(yǎng)物:取液體培養(yǎng)物100μL加到1.5mL無菌離心管中,8000rpm離心3min,盡量吸棄上清,加入50μL DNA抽提液充分混勻,100℃恒溫10min,13000rpm離心3min,取上清5μL進行PCR反應(yīng)。
2、固體培養(yǎng)物:挑取單克隆菌落與50μL DNA抽提液充分混勻,100℃恒溫10min,13000rpm離心3min,取上清5μL進行PCR反應(yīng)。
3、糞便樣品:挑取米粒大小糞便于滅菌離心管中,加入0.5mL生理鹽水,振蕩混勻,13000rpm離心3分鐘,棄上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻,100℃恒溫10min,13000rpm離心3min取上清5μL進行PCR反應(yīng)。
4、其他液體標(biāo)本:取標(biāo)本2-3mL,13000rpm離心3min,棄上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻,100℃恒溫10min,13000rpm離心3min取上清5μL進行PCR反應(yīng)。
注:陽性對照和陰性對照為已經(jīng)抽提好的核酸(無需提取),直接取5μL加入到反應(yīng)體系中即可。由于陽性對照濃度較高,建議在樣品制備區(qū)域加入陽性對照。
H4(人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0328CEM/C1(人急性細胞白血病細胞)5×106cells/瓶×2 小耳豬肺細胞;SEP-L1戊基尼泊金Pentyl Paraben質(zhì)量規(guī)格:美國進口
小鼠樹突狀細胞肉瘤低轉(zhuǎn)移細胞(VAP33-GFP融合蛋白穩(wěn)定過表達);DG6-VAP33-GFP尼泊金丁酯-d9Butyl-d9 Paraben質(zhì)量規(guī)格:美國進口
人視網(wǎng)膜色素上皮細胞(HRPEpiC)(5×105 )尼泊金乙酯-d5Ethyl-d5 Paraben質(zhì)量規(guī)格:美國進口
CM-M051小鼠頸上皮細胞*培養(yǎng)基100mL尼泊金甲酯-d4Methyl Paraben-d4質(zhì)量規(guī)格:美國進口
小鼠肥大細胞瘤細胞;P815 小鼠胰腺導(dǎo)管上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL尼泊金芐酯Benzyl Paraben質(zhì)量規(guī)格:美國進口
人臍靜脈內(nèi)皮細胞;HUV-EC 人胰腺星狀細胞*培養(yǎng)基 100mL耐爾藍A(>65%,BS)Nile blue A質(zhì)量規(guī)格:>65%,BS
人癌細胞;MDA-MB-157N-CBZ-beta-Z-β-Ala-OH質(zhì)量規(guī)格:0.98
TYRP1 Others Human 人 P1 / TYRP1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) CBZ-D-α-芐酯Z-Glu-OBzl質(zhì)量規(guī)格:>98%
CM-H134人角膜內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基100mLN-芐氧羰基-L-Z-Tyr-OH質(zhì)量規(guī)格:0.98
CNE1, 人鼻咽癌細胞系 草魚吻端細胞,ZC-7901細胞 SW480 [SW-480](人結(jié)腸癌細胞)Z-L-甲酯Z-Tyr-OMe質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
牛源細胞 肝癌細胞,HCCLM3細胞 C3細胞,小鼠白血病細胞重樓皂苷VI(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Polyphyllin VI
人胚腎細胞(SV40T基因修飾);293T/17重樓皂苷VII(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Polyphyllin VII
COCH Others Human 人 COCH / Cochlin 人細胞裂解液 (陽性對照) 質(zhì)量規(guī)格:≥97%,BRHyodeoxycholic acid
CL-0112HMy2.CIR(人B母細胞)5×106cells/瓶×2(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Hyodeoxycholic acid
DDC Others Human 人 DOPA Decarboxylase / DDC 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:效價測定Nystatin
吳茱萸探針法PCR鑒定試劑盒說明書SC-1(小鼠胚胎細胞) 5×106cells/瓶×23,4-二羥基shēng huà shì jì容量:RT5克
HCC1937(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0377LLC-WRC 256(大鼠腹水癌細胞)5×106cells/瓶×2 恒河猴腎細胞;LLC-MK24,4-二叔丁基-2,2-聯(lián) 98% 4 4'-DI-TqRT-BUTYL-2 2'-DIPYRIDYL 98 7914-19-3
人侵襲性脈絡(luò)膜色素瘤細胞;M6192,9-二甲基-4,7-二本基-1,10-啰啉shēng
儲存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。