更新時間:2024-11-30
秦艽染料法PCR鑒定試劑盒保存公司相關(guān)產(chǎn)品ic acid 125-46-2 分子式:C18H16O7 分子量:344.30千金子甾醇 Euphobiasteroid 千金子甾醇 Euphobiasteroid 28649-59-4 分子式:C32H40O8 分子量:552.66血根堿 Sanguinarine 血根堿 Sanguinarine 2447-54-3
儲存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
產(chǎn)品名稱 | 秦艽染料法PCR鑒定試劑盒保存 |
英文名稱 | gentianae macrophyllae |
貨號 | BH-P99644 |
特點(diǎn):
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)地黃保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。
6. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照《食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)阪崎腸桿菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
注:上述樣品建議經(jīng)過增菌后,收集培養(yǎng)物用于檢測。
二、DNA提?。?/span>
可采用PCR試劑盒配備的DNA抽提液,按以下說明進(jìn)行DNA核酸的粗提。也可采購上海澤葉生物科技有限公司生產(chǎn)的DNA提取試劑盒(過柱法-熒光配套)或其他合適的商業(yè)化產(chǎn)品,并按照相應(yīng)試劑盒說明進(jìn)行操作。
1、液體培養(yǎng)物:取液體培養(yǎng)物100μL加到1.5mL無菌離心管中,8000rpm離心3min,盡量吸棄上清,加入50μL DNA抽提液充分混勻,100℃恒溫10min,13000rpm離心3min,取上清5μL進(jìn)行PCR反應(yīng)。
2、固體培養(yǎng)物:挑取單克隆菌落與50μL DNA抽提液充分混勻,100℃恒溫10min,13000rpm離心3min,取上清5μL進(jìn)行PCR反應(yīng)。
3、糞便樣品:挑取米粒大小糞便于滅菌離心管中,加入0.5mL生理鹽水,振蕩混勻,13000rpm離心3分鐘,棄上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻,100℃恒溫10min,13000rpm離心3min取上清5μL進(jìn)行PCR反應(yīng)。
4、其他液體標(biāo)本:取標(biāo)本2-3mL,13000rpm離心3min,棄上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻,100℃恒溫10min,13000rpm離心3min取上清5μL進(jìn)行PCR反應(yīng)。
注:陽性對照和陰性對照為已經(jīng)抽提好的核酸(無需提取),直接取5μL加入到反應(yīng)體系中即可。由于陽性對照濃度較高,建議在樣品制備區(qū)域加入陽性對照。
人星形膠質(zhì)細(xì)胞總RNAHA NANiclosamide質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
HAVCR2 Others Mouse 小鼠 TIM3 / HAVCR2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (標(biāo)準(zhǔn)品)Niclosamide質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
化大家鼠肺成纖維細(xì)胞;NRmCiprofloxacin質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP32,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
CRL細(xì)胞,人胰腺癌細(xì)胞 人舌癌細(xì)胞,Tca-8113細(xì)胞 小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-A5(標(biāo)準(zhǔn)品)Ciprofloxacin質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
IMR-32(人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2Famciclovir質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR
大鼠胰島β細(xì)胞瘤細(xì)胞;RIN-m5FN-(2-羧乙基)亞氨基二乙酸(>98.0%(T))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)N-(2-Carboxyethyl)imidiacetic Acid
HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 三乙四胺-N,N,N',N'',N''',N'''-六乙酸(>98.0%(T))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)Triethylenetetramine-N,N,N',N'',N''',N'''-hexaacetic Acid
T-107A(含10mL酶解緩沖液)1mL皂土(膨潤土)(Bentone SD-1,適于中至低極性溶劑)質(zhì)量規(guī)格:Bentone SD-1,適于中至低極性溶劑Bentonite
HEp-2細(xì)胞,人喉表皮樣癌細(xì)胞 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞,HUVE-12/CRL2480細(xì)胞 敘利亞倉鼠腎細(xì)胞;BHK-21皂土(膨潤土)(Bentone SD-2,適于中高極性溶劑)質(zhì)量規(guī)格:Bentone SD-2,適于中高極性溶劑Bentonite
C2C12(小鼠成肌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2活性炭粉(AR,200目,粉末狀,褐色)質(zhì)量規(guī)格:AR,200目,粉末狀,褐色Activated charcoal
ICAM3 Others Human 人 CD50 / ICAM3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 4,4'-(六氟異亞丙基)二酞1(>98.0%(GC)(T))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T)4,4'-(Hexafluoroisopropylidene)diphthalic Anhydride
中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-5beta 41,2.5 CL5 Carrying P5b/dhfr3,3',4,4'-二苯酮四羧酸二酐(>96.0%(T))質(zhì)量規(guī)格:>96.0%(T)3,3',4,4'-Benzophenetetracarboxylic Dianhydride
RGMA Others Human 人 RGMA 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 三環(huán)[6.4.0.02,7]十二烷-1,8:2,7-四羧酸二酐(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)Tricyclo[6.4.0.02,7]dodecane-1,8:2,7-tetracarboxylic Dianhydride
A375 人惡性色素瘤細(xì)胞ε-己內(nèi)酯(>99.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC)ε-Caprolactone
C6-EGFP-puro(慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞 C6-EGFP-puro (leiviral consuct stable sain) of rat brain glioma cells DMEM+10% FBS+2ug/ml puromycin四氫生物蝶呤(THB)二鹽酸質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Tetrahydrobiopterin (THB) di
秦艽染料法PCR鑒定試劑盒保存CD33 Others Mouse 小鼠 CD33 / Siglec-3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 硫氫化鈉水合物,英文名或英文縮寫:wo7ium xy7sulfide hydrate,級別:3.5N,200-250目,規(guī)格:25克
MPC-83 胰腺腺泡細(xì)胞癌尿酸鈉 Uric acid salt 1198-77-2 1G 通用試劑
IMR-32人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 IMR-32 human neuroblastoma cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBSL-半胱安醋酯言醋鹽 L-Cys
實(shí)驗(yàn)流程:
1. 整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。