更新時(shí)間:2024-11-25
NCI-H524人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:人淋巴內(nèi)皮細(xì)胞裂解物HLECL 人血清淀粉樣蛋白P(SAP)ELISA 試劑盒 IgM/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗IgM 0.1mlGGA3: γ-銜接蛋白相關(guān)蛋白3抗體 雜交瘤(B類);Z172A4C4C6F3G12 Butt's 淋巴瘤細(xì)胞,Raji細(xì)胞 HBZY-1細(xì)胞,大鼠腎小球系膜細(xì)胞E
公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷!
1、細(xì)胞傳代:
1)細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的 80%面積時(shí),棄 25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用 PBS 清洗細(xì)胞一次;
2)添加 0.25%消化液約 1ml 至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后加入 5ml 培養(yǎng)
液終止消化,再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至 15ml 離心管中,1000rpm 離心 5min;
3)棄上清,沉淀細(xì)胞用 1-2ml 培養(yǎng)基重懸,然后按 1:2 比例進(jìn)行分瓶傳代,最后放入 37℃,5%CO2細(xì)胞
培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
2、細(xì)胞凍存:
1)細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的 80%面積時(shí),棄 25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用 PBS 清洗細(xì)胞一次;
2)添加 0.25%消化液約 1ml 至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終
止消化,輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至 15ml 離心管中,1000rpm 離心 5min;
3)用適量的凍存液(FBS:DMSO=9 :1)重懸細(xì)胞,并放置于凍存管中;
4)先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃過夜,24h 后轉(zhuǎn)入液氮中進(jìn)行長期保存。使用程序
降溫盒可直接放入-80℃。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
NCI-H524人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 | 1×106 | P-X894 |
一、商品介紹:
產(chǎn)品名稱 | NCI-H524人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 |
種屬 | 人 |
細(xì)胞別稱 | NCI-H524;NCIH524;H524;人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 |
年齡性別 | 男;63歲 |
生長特性 | 懸浮生長 |
組織來源 | 肺;源自轉(zhuǎn)移部位:淋巴結(jié) |
細(xì)胞形態(tài) | 圓形 |
背景簡(jiǎn)介 | NCI-H524細(xì)胞1982年建系,源自非小細(xì)胞肺癌男性患者的轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)。 |
生物安全等級(jí) | 1 |
細(xì)胞規(guī)格 | 1×106 |
支原體檢測(cè) | 無 |
基因表達(dá)情況 | |
保藏機(jī)構(gòu) | ATCC; CRL-5831 |
培養(yǎng)基 | RPMI-1640+10%FBS+1%P/S雙抗 |
培養(yǎng)條件 | 氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃ |
凍存條件 | 無血清凍存液,液氮儲(chǔ)存 |
倍增時(shí)間 | ~100 hours |
二、細(xì)胞培養(yǎng)操作
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10 cm皿中,加入約8 mL培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,使消化液浸潤所有細(xì)胞,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min(視細(xì)胞情況而定),然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中,1000 rpm離心5 min,棄去上清液,補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。
c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 3) 細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例;a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液,使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠腎小管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 大鼠神經(jīng)介素S(NMS)ELISA試劑盒 CXCR3(Mouse CXC-chemokine receptor 3) 小鼠CXC趨化因子受體3 96T
NCX2: 鈣交換蛋白2抗體 HBL-100細(xì)胞,整合SV40基因的上皮細(xì)胞 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞,HCT-15細(xì)胞 CM-R021大鼠胰腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL
VTCN1 Others Mouse 小鼠 B7-H4 / B7S1 / B7x 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 大鼠神經(jīng)介素B(NMB)ELISA試劑盒 NF(Human neurofilament protein) 人神經(jīng)絲蛋白 96T
NDRG2: 抑癌基因NDRG2抗體 人臍動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞HUAEC
FO小鼠骨髓瘤細(xì)胞 Mouse myeloma cell line FO DMEM培養(yǎng)基+10%FBS 大鼠神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA試劑盒 KP(Human kaliuretic peptide) 人利尿肽 96T
人心肌成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 人CXC趨化因子配體16(CXCL16)ELISA 試劑盒 MAP1LC3A(microtubule-associated protein 1 light chain 3) 自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3抗原 0.5mg
IL2 Receptor beta: 白介素2受體β鏈抗體 幼蚊細(xì)胞;C6/36 大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤,PC-12細(xì)胞 HeLa 229(細(xì)胞)
HEPACAM2 Others Rat 大鼠 HepaCAM2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 人CX3C趨化因子受體1(CX3CR1)ELISA 試劑盒 TSLC1 (tumor suppressor in lung cancer-1) 肺癌阻抑基因1抗原 0.5mg
Interferon alpha 2b: 干擾素α2b抗體 犬腎細(xì)胞;MDCK(NBL-2)
PC-12細(xì)胞,大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(高分化) HT-29(結(jié)腸癌細(xì)胞) 人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞;HEC-1-B 人c-sis ELISA 試劑盒 TTF-1 (Thyroid Transcription Factor-1) 甲狀腺核轉(zhuǎn)錄因子-1抗原 0.5mg
NCI-H524人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞人真皮成纖維細(xì)胞-新生兒裂解物HDF-n L 大鼠白介素20(IL-20)ELISA試劑盒 cath-D(Human cathepsin D) 人組織D 96T
RED: 軟骨肉瘤相關(guān)蛋白2抗體 獼猴皮膚細(xì)胞;MMS7
人胚腎細(xì)胞(SV40T基因修飾);293T/17 人主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 大鼠白介素20(IL20)ELISA試劑盒 HSL(Human hormone sensitive lipase) 人激素敏感性脂肪酶 96T
RNF210: 環(huán)指蛋白210抗體 CL-0449SW 780(人膀胱移行細(xì)胞癌)5×106cells/瓶×2
人絨毛膜間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞 大鼠白介素2(IL-2)ELISA試劑盒 PK(Human pancreatickininogenase) 人肽原酶 96T
三、培養(yǎng)注意事項(xiàng)
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。
3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。
4. 貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞,再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞 的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。
8. 備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請(qǐng)換用按照說明書細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。 收到細(xì)胞后第一次傳代建議 1:2 傳代 。
9. 注意: 1:2 傳代就是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè) T25 瓶或者 2 個(gè) 6cm 皿。不是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè)10cm 皿。