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桔梗探針法PCR鑒定試劑盒說明書

更新時間:2024-11-24

簡要描述:

桔梗探針法PCR鑒定試劑盒說明書公司相關(guān)產(chǎn)品 青蒿酸 Artemisinic acid 80286-58-4 分子式:C15H22O2 分子量:234.33
遼東楤木皂苷Ⅶ Araloside VII 遼東楤木皂苷Ⅶ Araloside VII 340982-22-1 分子式:C54H88O24 分子量:1121.30
亥茅酚苷 Sec-O-Glucosylhamaud

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特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)地黃保守序列設(shè)計的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。
6. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

產(chǎn)品名稱

桔梗探針法PCR鑒定試劑盒說明書

英文名稱

platycodonis

貨號

BH-P99693

使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照《食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗阪崎腸桿菌檢驗要求進行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,54,32。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
注:上述樣品建議經(jīng)過增菌后,收集培養(yǎng)物用于檢測。
二、DNA提取:
可采用PCR試劑盒配備的DNA抽提液,按以下說明進行DNA核酸的粗提。也可采購上海澤葉生物科技有限公司生產(chǎn)的DNA提取試劑盒(過柱法-熒光配套)或其他合適的商業(yè)化產(chǎn)品,并按照相應(yīng)試劑盒說明進行操作。
1、液體培養(yǎng)物:取液體培養(yǎng)物100μL加到1.5mL無菌離心管中,8000rpm離心3min,盡量吸棄上清,加入50μL DNA抽提液充分混勻,100恒溫10min,13000rpm離心3min,取上清5μL進行PCR反應(yīng)。
2、固體培養(yǎng)物:挑取單克隆菌落與50μL DNA抽提液充分混勻,100恒溫10min,13000rpm離心3min,取上清5μL進行PCR反應(yīng)。
3、糞便樣品:挑取米粒大小糞便于滅菌離心管中,加入0.5mL生理鹽水,振蕩混勻,13000rpm離心3分鐘,棄上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻,100恒溫10min,13000rpm離心3min取上清5μL進行PCR反應(yīng)。
4、其他液體標本:取標本2-3mL,13000rpm離心3min,棄上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻,100恒溫10min,13000rpm離心3min取上清5μL進行PCR反應(yīng)。
注:陽性對照和陰性對照為已經(jīng)抽提好的核酸(無需提取),直接取5μL加入到反應(yīng)體系中即可。由于陽性對照濃度較高,建議在樣品制備區(qū)域加入陽性對照。
實驗流程:
1. 整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。
儲存條件:
14或-20樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
Vero(非洲綠猴腎細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠胚胎成纖維細胞;3T3-L1硫酸小檗堿(標準品)Berberine hydrogen sulphate質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標準品

人小膠質(zhì)細胞裂解物HML噻嗪二酮(標準品)Xanthiazone 質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標準品

CLEC7A Others Human CLEC7A / Dectin-1 / CLECSF12 人細胞裂解液 (陽性對照) 噻嗪二酮苷(標準品)Xanthiside 質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標準品

人胃癌細胞;MKN-45多被銀蓮花皂苷R8(標準品)Raddeaside R8質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標準品

小鼠胰腺癌細胞(B);Pan02 透明質(zhì)酸酶(100mL酶解緩沖液) 10mL虎掌草皂甙D(標準品)無質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標準品
CN3 Others Human CN3 / Coactin-3 人細胞裂解液 (陽性對照) 芹菜素質(zhì)量規(guī)格:HPLC97%,BRApigenin

大鼠骨髓瘤細胞;IR983F芹菜素(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標準品Apigenin

REG3A Others Rat 大鼠 REG3A 人細胞裂解液 (陽性對照) 氧化鉍質(zhì)量規(guī)格:AR,>99%Bismuth oxide

人胰島β細胞*培養(yǎng)基 100mL2--1,3-質(zhì)量規(guī)格:進口原裝,98%2-Chloro-1,3-propanediol

GNM細胞,上頜牙齦癌頸結(jié)轉(zhuǎn)移癌 宋氏志賀氏菌 APP-PS1(M146L)雙基因轉(zhuǎn)染CHO細胞株;7WML6.0富馬酸*質(zhì)量規(guī)格:>99%Bisoprolol fumarate
HEC-1-A細胞,人內(nèi)膜腺癌細胞 鼠雜交骨髓瘤細胞,K6H6/B5細胞 新生兒表皮角化細胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)鹽酸*質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRVenlaine

FC33(人胚胎腎細胞(Asp-2基因修飾)) 5×106cells/瓶×2原卟啉IX質(zhì)量規(guī)格:>95%Protoporphyrin IX

HWP subcutaneous Pellet 人類皮下白前脂肪細胞團塊 > 1 mio.cells 人少突膠質(zhì)前體細胞(懸浮生長)RNAHOPC-os NA甲磺酸*(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品Ropivacaine mesylate

CL-00025637(人膀胱癌細胞)5×106cells/瓶×2甲磺酸*質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRRopivacaine mesylate

NGF Others Mouse 小鼠 β-NGF / Beta-NGF CHO細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸*酯質(zhì)量規(guī)格:≥653µg/mg,BRCefetamet pivoxil
桔梗探針法PCR鑒定試劑盒說明書CD70 Protein Rat 重組大鼠 CD70 / CD27L / TNFSF7 蛋白 (His 標簽)去氧膽酸鹽瓊脂shēng huà shì jì容量:100

人絨毛間葉成纖維細胞(HVT)( 5×105 ) MCF-7(MCF7)(ATCC來源), 人癌細胞 Human-2.5-二羧醋97% 2,5-Thiophqnqdiccrboxylic ccid 48-31-9

人皮膚色素瘤細胞;SK-MEL-1氧化槐果堿,英文名或英文縮寫:Oxysophocarpine,級別:BR,98%,規(guī)格:

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