更新時(shí)間:2024-11-23
鯊魚源性成分(Shark)核酸檢測試劑盒公司相關(guān)產(chǎn)品BNL CL.2(小鼠胚胎肝細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CM-M046小鼠腸上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL 多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞;RPMI-8226 [RPMI8826]2-溴-9,9-二甲基芴(>98.0%(GC))2-Bromo-9,9-dimethylfluorene>98.0%(GC)獼猴皮膚細(xì)胞;MMS42,7-二氨基芴(>98.
訂購信息:
產(chǎn)品名稱:鯊魚源性成分(Shark)核酸檢測試劑盒
規(guī)格:50T
編號:BH-P96955
分類:熒光PCR法
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
準(zhǔn)備物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
使用及效果:
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
檢測步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個(gè)測試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
GHR Others Mouse 小鼠 GHR 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 肉桂酸()trans-Cinnamic acidGC≥98%,
細(xì)胞凍存液CFM/祖師麻甲素()DaphnetinHPLC≥98%,
FLT3 Others Mouse 小鼠 FLT-3 / CD135 / FLK-2 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 三氯蔗糖()SucraloseHPLC≥98%,
胃腺癌細(xì)胞;BGC-823三七皂甙R1()Notoginsenoside R1HPLC≥98%,
CCC-HEL-1細(xì)胞,胚肝二倍體細(xì)胞 小鼠腹水瘤細(xì)胞,SAC-II B2細(xì)胞 EB病毒轉(zhuǎn)化的絨猴細(xì)胞;B95-8三葉豆紫檀苷()TrifolirhizinHPLC≥98%,
SP2/0, 小鼠骨髓瘤細(xì)胞()含量測定Methylthioninium Chloride Trihydrate
mEPC, 小鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞-骨髓 小鼠精母細(xì)胞,GC-2spd細(xì)胞 Mv.1.Lu(NBL-7)(貂肺上皮細(xì)胞)鈉()供HPLC法含量測定用Warfarin
類原巨核細(xì)胞型白血病細(xì)胞;UT-7鈉>98%,BRWarfarin
CD200R4 Others Mouse 小鼠 CD200R4 / CD200 Receptor 4 / CD200RLa 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) ()HPLC含量測定Lomustine
小鼠T瘤細(xì)胞(雞OVA基因修飾);E.G7-OVA度洛西汀美國進(jìn)口Duloxetine
鯊魚源性成分(Shark)核酸檢測試劑盒TDGF1 Protein Human 重組 Cripto / TDGF1 蛋白 (His 標(biāo)簽)偏重亞鉀500克RT
臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞;HUV-EC 胰腺星狀細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL三基錄硅烷 Chlorotriqthylsilcnq 994-30-9
癌細(xì)胞;MDA-MB-157異胍 (常規(guī)) Guanidine thiocyanate (≥97.0%) 593-84-0 25G 通用試劑
TYRP1 Others Human P1 / TYRP1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) PEA瓊脂10張/盒
CM-H134角膜內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL(二甲亞砜)