人elisa試劑盒操作過(guò)程:
1、從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2、設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、樣本孔和空白孔,空白孔什么都不加;人elisa試劑盒孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL。
3、待測(cè)樣本孔先加待測(cè)樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL。
4、隨后標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中(空白孔不加)參與辣根過(guò)氧化物酶(HRP)符號(hào)的檢測(cè)抗體100μL,,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5、棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6、全部孔參與底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7、全部孔參與停止液50μL,15min內(nèi),在450nm波利益測(cè)定各孔的OD值。
人elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培育,而不適用于人elisa試劑盒培育,可運(yùn)用滴片法;
2.所運(yùn)用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制作,并通過(guò)鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片十分薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.假如需要更多成長(zhǎng)狀況共同的細(xì)胞,可以運(yùn)用較大的培育皿,但不宜過(guò)大,以避免培育液的浪費(fèi)和添加污染機(jī)率;
5.假如細(xì)胞貼壁成長(zhǎng)才能較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴(lài)氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然曬干。