更新時間:2024-11-23
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訂購信息:
產品名稱:山羊痘病毒(GTPV)核酸定性檢測試劑盒
規(guī)格:50T
編號:BH-P97000
分類:熒光PCR法
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
準備物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產品說明書 1份
使用及效果:
產品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應,無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
PCR反應特點
(1) 特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行,結合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術概論。
檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
EFNB2 Others Rat 大鼠 Ephrin-B2 / EFNB2 細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸()Bleomycin A5 HPLC含量測定
大鼠皮下脂肪細胞*培養(yǎng)基 100mL琥乙()Erythromycin ethylsuccinate雜質檢查
FRhK-4恒河猴胚腎細胞 FRhK-4 Ganges RIver monkey embryo kidney cell DMEM培養(yǎng)基+10%FBS()Griseofulvin含量測定
IFNA1 Protein Rat 重組大鼠 IFN-alpha / IFNA1 / IFN 蛋白 (Fc 標簽)Tivantinib(ARQ197)Tivantinib, ARQ 197>98%,c-Met抑制劑
MCF 7B(癌細胞) 5×106cells/瓶×2 BHK(幼倉鼠腎細胞)3-乙氧基-4-羥基苯()Ethyl vanillin系統(tǒng)適應性
永生化細胞;CNLMG-B5538LC()HPLC>98%,Allopurinol
HA Others H2N2 甲型流感 H2N2 (A/Canada/720/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 細胞裂解液 (陽性對照) 1丙基雌醇;1丙雌醇含量≥98.0%Allylestrenol
CL-0412PC-12(大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞)5×106cells/瓶×21丙基雌醇()HPLC≥97.0%,Allylestrenol
S100A8 Others Human S100A8 / CAGA / p8 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 阿利新藍8GXBS級,干品含量>50%Alcian blue 8GX
管內皮細胞RNAHDLEC miRNA5 μg四氮唑藍;BTBSBlue tetrazolium
山羊痘病毒(GTPV)核酸定性檢測試劑盒hMoCD14+-PB-c single donorpre-screened 外周血來源的類CD14+單核細胞,單一來源,預選型 10 million 結膜成纖維細胞HConF4'-庚基苯乙酮(>96.0%(GC))>96.0%(GC)4'-Heptylacetophenone
眼球脈絡膜成纖維細胞HOCF4'-正辛基苯乙酮(>95.0%(GC))>95.0%(GC)4'-n-Octylacetophenone
SIRPG Others Cynomolgus 食蟹猴 SIRPG / SIRP gamma / CD172g 細胞裂解液 (陽性對照) 4'-戊基苯乙酮(>95.0%(GC))>95.0%(GC)4'-Pentylacetophenone
非洲綠猴腎細胞;CV-14-(反-4-丙基環(huán)己基)苯腈(>98.0%(GC))>98.0%(GC)4-(trans-4-Propylcyclohexyl)benzonitrile
NCI-H1975細胞,非小細胞肺腺癌細胞 鼠肝星形細胞,HSC-T6細胞 CM-R047大鼠腸微血管細胞*培養(yǎng)基100mL4-磺酰杯[4]芳烴水合物(>94.0%(T))>94.0%(T)4-Sulfocalix[4]arene Hydrate