抗原上那部分可以引起機(jī)體產(chǎn)生抗體的分子結(jié)構(gòu),叫做抗原決定簇。一個(gè)抗原上可以有好幾個(gè)不同的抗原決定簇,因而使機(jī)體產(chǎn)生好幾種不同的抗體,最終產(chǎn)生出抗體是漿細(xì)胞。在同一種抗原決定簇,在機(jī)體內(nèi)也可以由好幾種克隆來產(chǎn)生抗體,形成好幾種單克隆抗體混雜物,稱為多克隆抗體 (polyclonal antibody)。
優(yōu)點(diǎn):
多克隆抗體可識(shí)別任一抗原上的多個(gè)表位,因此具有以下優(yōu)點(diǎn):
高親和性:由于靶蛋白上的多個(gè)表位能夠結(jié)合不止一個(gè)抗體分子,多克隆抗體可放大低表達(dá)水平靶蛋白的信號(hào)。但是,這會(huì)影響定量實(shí)驗(yàn)(如流式細(xì)胞術(shù)實(shí)驗(yàn))結(jié)果的準(zhǔn)確性。
可識(shí)別多個(gè)表位,有利于免疫沉淀 (IP) 和染色質(zhì)免疫沉淀 (ChIP) 實(shí)驗(yàn)獲得更好的結(jié)果。
與單克隆抗體相比,對微小抗原變化(例如多態(tài)性、糖基化異質(zhì)性或者輕微變性)的包容性更強(qiáng)。
可識(shí)別與免疫原蛋白質(zhì)具有高度同源性的蛋白質(zhì),還可用于篩查非免疫原物種的靶蛋白。
通常是檢測變性蛋白質(zhì)的shou選。
多表位通常可提升檢測的穩(wěn)定性。
缺點(diǎn):
易產(chǎn)生批次間差異。
產(chǎn)生大量非特異性抗體,可能會(huì)在某些應(yīng)用中產(chǎn)生背景信號(hào)。
由于具有多個(gè)表位,檢測免疫原序列的交叉反應(yīng)性非常重要。
不適用于探測抗原的特定結(jié)構(gòu)域,因?yàn)榭寡逋ǔ?huì)識(shí)別多個(gè)結(jié)構(gòu)域。