更新時(shí)間:2024-11-23
Ar Qual 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10是采用大腸桿菌經(jīng)特殊工藝處理得到的感受態(tài)細(xì)胞,可用于DNA 的化學(xué)轉(zhuǎn)化。使用pUC19 質(zhì)粒檢測(cè),轉(zhuǎn)化效率可達(dá)108個(gè)轉(zhuǎn)化子/μg質(zhì)粒DNA,-70℃保存3個(gè)月轉(zhuǎn)化效率可保持在90%以上。
Ar Qual 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10以下是的訂購(gòu)信息儲(chǔ)存條件:-70℃凍存
操作方法:
1. 取-80℃保存的農(nóng)桿菌感受態(tài)于室溫或手心片刻待其部分融化,處于冰水混合狀態(tài)時(shí)插入冰中。
2.每100 μl感受態(tài)加入0.01-1 μg質(zhì)粒DNA(轉(zhuǎn)化效率較高,*次使用前做預(yù)實(shí)驗(yàn)確定所加質(zhì)粒的量),用手管底混勻,依次于冰上靜置5分鐘、液氮5分鐘、37℃水浴5分鐘、冰浴5分鐘。
Ar Qual 感受態(tài)細(xì)胞100ul*103. 加入700 μl無(wú)抗生素的LB或YEB液體培養(yǎng)基,于28℃振蕩培養(yǎng)2~3小時(shí)。
4. 6000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊涂布于含相應(yīng)抗生素的LB或YEB平板上,倒置放于28℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)2-3天
注意事項(xiàng)
1. 加入質(zhì)粒時(shí)體積不應(yīng)大于感受態(tài)體積的1/10;質(zhì)粒不純或存在乙醇等有機(jī)物污染,轉(zhuǎn)化效率急劇下降;質(zhì)粒增大一倍,轉(zhuǎn)化效率下降一個(gè)數(shù)量級(jí)。
Ar Qual 感受態(tài)細(xì)胞100ul*102. 混入質(zhì)粒時(shí)應(yīng)輕柔操作。轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)粒可相應(yīng)減少終用于涂板的菌量。
3. 平板上陽(yáng)性克隆密度過(guò)大時(shí),由于營(yíng)養(yǎng)不足,陽(yáng)性克隆生長(zhǎng)變慢,菌落變小,為了獲得大的菌落,應(yīng)減少質(zhì)粒用量。
4. 濃度不應(yīng)高于25 μg/ml,過(guò)高的濃度不利于農(nóng)桿菌生長(zhǎng),會(huì)降低其生長(zhǎng)速度和轉(zhuǎn)化效率。本公司感受態(tài)計(jì)算轉(zhuǎn)化效率時(shí)所用平板只含有50 μg/ml kan,若所用平板含有20 μg/ml rif則轉(zhuǎn)化效率降低到1/2。
5. 培養(yǎng)基中加入的目的是防止雜菌生長(zhǎng)、篩選農(nóng)桿菌;根據(jù)所用菌株抗性加入Ti質(zhì)粒篩選抗生素可防止Ti質(zhì)粒丟失,但Ti質(zhì)粒篩選抗生素不利于農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)基因操作,所以一般培養(yǎng)農(nóng)桿菌時(shí)不考慮這些抗生素,Ti質(zhì)粒丟失的概率極低(可以忽略)。
HGF 大鼠肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子 規(guī)格: 48T/96T
SCFR 大鼠干細(xì)胞因子受體 規(guī)格: 48T/96T
SCF/MGF 大鼠干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長(zhǎng)因子 規(guī)格: 48T/96T
IP-10/CXCL10 大鼠干擾素誘導(dǎo)蛋白10 規(guī)格: 48T/96T
CR 大鼠鈣結(jié)合蛋白 規(guī)格: 48T/96T
CAM 大鼠鈣調(diào)素 規(guī)格: 48T/96T
CaN 大鼠鈣調(diào)磷酸酶 規(guī)格: 48T/96T
CAMK 2 大鼠鈣/鈣調(diào)素依賴(lài)性蛋白激酶2 規(guī)格: 48T/96T
CPSA 大鼠復(fù)合前列腺特異性抗原 規(guī)格: 48T/96T
sIgA 大鼠分泌型免疫球蛋白A 規(guī)格: 48T/96T
SP-A 大鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A 規(guī)格: 48T/96T
DPPⅣ 大鼠二肽基肽酶Ⅳ 規(guī)格: 48T/96T
CA 大鼠兒茶酚胺 規(guī)格: 48T/96T
DAT 大鼠多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白 規(guī)格: 48T/96T
D2R 大鼠多巴胺D2受體 規(guī)格: 48T/96T
D1R 大鼠多巴胺D1受體 規(guī)格: 48T/96T
D1R 大鼠多巴胺D1受體 規(guī)格: 48T/96T
DA 大鼠多巴胺 規(guī)格: 48T/96T
TE 大鼠端粒酶 規(guī)格: 48T/96T
M-AChR 大鼠毒蕈堿型乙酰受體 規(guī)格: 48T/96T
AZT 大鼠 規(guī)格: 48T/96T
AIF 大鼠凋亡誘導(dǎo)因子 規(guī)格: 48T/96T
FASL 大鼠凋亡相關(guān)因子配體 規(guī)格: 48T/96T
FAS/CD95 大鼠凋亡相關(guān)因子 規(guī)格: 48T/96T
FⅧAg 大鼠第八因子相關(guān)抗原 規(guī)格: 48T/96T
Resistin 大鼠抵抗素 規(guī)格: 48T/96T
HIF-1α 大鼠低氧誘導(dǎo)因子1α 規(guī)格: 48T/96T
LDL-IC 大鼠低密度脂蛋白免疫復(fù)合物 規(guī)格: 48T/96T
大鼠的牛血清白蛋白殘留檢測(cè)ELISA Kit,48T/96T 大鼠的牛血清白蛋白殘留檢測(cè)ELISA Kit,48T/96T 規(guī)格: 48T/96T
PP 大鼠蛋白磷酸酶 規(guī)格: 48T/96T
PKB 大鼠蛋白激酶B 規(guī)格: 48T/96T
CCK 大鼠膽囊收縮素/腸促肽 規(guī)格: 48T/96T
CETP 大鼠酯轉(zhuǎn)移蛋白 規(guī)格: 48T/96T
Ar Qual 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10 MCP-4/CCL13 大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4 規(guī)格: 48T/96T
MCP-3/CCL7 大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白3 規(guī)格: 48T/96T
MCP-2/CCL8 大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白2 規(guī)格: 48T/96T
MCP-1/CCL2/MCAF 大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白1 規(guī)格: 48T/96T