更新時(shí)間:2024-11-22
BJ5183-AD-1 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50菌株一種常用于質(zhì)??寺〉木?。其φ80lacZΔM15基因的產(chǎn)物可與pUC載體編碼的b-半乳糖苷酶氨基端實(shí)現(xiàn)a互補(bǔ),可用于藍(lán)白斑篩選。recA1和endA1 的突變有利于克隆DNA 的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒DNA的提取。
BJ5183-AD-1 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50以下是的訂購信息儲(chǔ)存條件:-70℃凍存
操作方法:
1. 取-80℃保存的農(nóng)桿菌感受態(tài)于室溫或手心片刻待其部分融化,處于冰水混合狀態(tài)時(shí)插入冰中。
BJ5183-AD-1 感受態(tài)細(xì)胞100ul*502.每100 μl感受態(tài)加入0.01-1 μg質(zhì)粒DNA(轉(zhuǎn)化效率較高,*次使用前做預(yù)實(shí)驗(yàn)確定所加質(zhì)粒的量),用手管底混勻,依次于冰上靜置5分鐘、液氮5分鐘、37℃水浴5分鐘、冰浴5分鐘。
3. 加入700 μl無抗生素的LB或YEB液體培養(yǎng)基,于28℃振蕩培養(yǎng)2~3小時(shí)。
4. 6000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊涂布于含相應(yīng)抗生素的LB或YEB平板上,倒置放于28℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)2-3天
注意事項(xiàng)
BJ5183-AD-1 感受態(tài)細(xì)胞100ul*501. 加入質(zhì)粒時(shí)體積不應(yīng)大于感受態(tài)體積的1/10;質(zhì)粒不純或存在乙醇等有機(jī)物污染,轉(zhuǎn)化效率急劇下降;質(zhì)粒增大一倍,轉(zhuǎn)化效率下降一個(gè)數(shù)量級(jí)。
2. 混入質(zhì)粒時(shí)應(yīng)輕柔操作。轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)??上鄳?yīng)減少終用于涂板的菌量。
3. 平板上陽性克隆密度過大時(shí),由于營養(yǎng)不足,陽性克隆生長變慢,菌落變小,為了獲得大的菌落,應(yīng)減少質(zhì)粒用量。
4. 濃度不應(yīng)高于25 μg/ml,過高的濃度不利于農(nóng)桿菌生長,會(huì)降低其生長速度和轉(zhuǎn)化效率。本公司感受態(tài)計(jì)算轉(zhuǎn)化效率時(shí)所用平板只含有50 μg/ml kan,若所用平板含有20 μg/ml rif則轉(zhuǎn)化效率降低到1/2。
5. 培養(yǎng)基中加入的目的是防止雜菌生長、篩選農(nóng)桿菌;根據(jù)所用菌株抗性加入Ti質(zhì)粒篩選抗生素可防止Ti質(zhì)粒丟失,但Ti質(zhì)粒篩選抗生素不利于農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)基因操作,所以一般培養(yǎng)農(nóng)桿菌時(shí)不考慮這些抗生素,Ti質(zhì)粒丟失的概率極低(可以忽略)。
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大鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)ELISA試劑盒 :英文名稱; Rat macrophage inflammatory protein 3α,MIP-3α ELISA Kit 購買我公司ELISA試劑盒保證質(zhì)量,靈敏性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)已經(jīng)得到廣大客戶的認(rèn)可,您可放心,且我司有專門的售后部門對(duì)您進(jìn)行全線跟蹤。 :規(guī)格; 96T/48T 大鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)ELISA試劑盒廠家 大鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)ELISA試劑盒報(bào)價(jià)
大鼠神經(jīng)生長因子(NGF)ELISA試劑盒 :英文名稱; Rat Nerve growth factor,NGF ELISA kit 購買我公司ELISA試劑盒保證質(zhì)量,靈敏性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)已經(jīng)得到廣大客戶的認(rèn)可,您可放心,且我司有專門的售后部門對(duì)您進(jìn)行全線跟蹤。 :規(guī)格; 96T/48T 大鼠神經(jīng)生長因子(NGF)ELISA試劑盒廠家 大鼠神經(jīng)生長因子(NGF)ELISA試劑盒報(bào)價(jià)
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大鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子4(NT-4)ELISA試劑盒 :英文名稱; Rat Neurotrophin 4,NT-4 ELISA KIT 購買我公司ELISA試劑盒保證質(zhì)量,靈敏性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)已經(jīng)得到廣大客戶的認(rèn)可,您可放心,且我司有專門的售后部門對(duì)您進(jìn)行全線跟蹤。 :規(guī)格; 96T/48T 大鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子4(NT-4)ELISA試劑盒廠家 大鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子4(NT-4)ELISA試劑盒報(bào)價(jià)
大鼠血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)ELISA試劑盒 :英文名稱; Rat Platelet-Derived Growth Factor Soluble Receptor α,PDGFsR-α ELISA kit 購買我公司ELISA試劑盒保證質(zhì)量,靈敏性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)已經(jīng)得到廣大客戶的認(rèn)可,您可放心,且我司有專門的售后部門對(duì)您進(jìn)行全線跟蹤。 :規(guī)格; 96T/48T 大鼠血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)ELISA試劑盒廠家 大鼠血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)ELISA試劑盒報(bào)價(jià)
BJ5183-AD-1 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50 大鼠血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)ELISA試劑盒 :英文名稱; Rat Platelet-Derived Growth Factor AB,PDGF-AB ELISA kit 購買我公司ELISA試劑盒保證質(zhì)量,靈敏性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)已經(jīng)得到廣大客戶的認(rèn)可,您可放心,且我司有專門的售后部門對(duì)您進(jìn)行全線跟蹤。 :規(guī)格; 96T/48T 大鼠血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)ELISA試劑盒廠家 大鼠血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)ELISA試劑盒報(bào)價(jià)
大鼠干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長因子(SCF/MGF)ELISA試劑盒 :英文購買我公司ELISA試劑盒保證質(zhì)量