更新時(shí)間:2024-11-22
H1人胚胎干細(xì)胞H1 (WA01)公司正在出售的產(chǎn)品:散鱗鏡鯉尾鰭細(xì)胞;YZ21 小鼠DNA損傷誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄因子3(DDIT3)ELISA試劑盒 Sphingomyelin Synthase 2: 鞘0脂合成酶2抗體 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;HCT-15 [HCT15] 大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基 100mLCN1 Others Mouse 小鼠 Coactin 1 / CN1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照
公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷!
1、細(xì)胞傳代:
1)細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的 80%面積時(shí),棄 25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用 PBS 清洗細(xì)胞一次;
2)添加 0.25%消化液約 1ml 至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后加入 5ml 培養(yǎng)
液終止消化,再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至 15ml 離心管中,1000rpm 離心 5min;
3)棄上清,沉淀細(xì)胞用 1-2ml 培養(yǎng)基重懸,然后按 1:2 比例進(jìn)行分瓶傳代,最后放入 37℃,5%CO2細(xì)胞
培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
2、細(xì)胞凍存:
1)細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的 80%面積時(shí),棄 25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用 PBS 清洗細(xì)胞一次;
2)添加 0.25%消化液約 1ml 至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終
止消化,輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至 15ml 離心管中,1000rpm 離心 5min;
3)用適量的凍存液(FBS:DMSO=9 :1)重懸細(xì)胞,并放置于凍存管中;
4)先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃過(guò)夜,24h 后轉(zhuǎn)入液氮中進(jìn)行長(zhǎng)期保存。使用程序
降溫盒可直接放入-80℃。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
H1人胚胎干細(xì)胞H1 (WA01) | 1×106 | P-X722 |
二、細(xì)胞培養(yǎng)操作
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)為主。將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10 cm皿中,加入約8 mL培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,使消化液浸潤(rùn)所有細(xì)胞,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min(視細(xì)胞情況而定),然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無(wú)菌離心管中,1000 rpm離心5 min,棄去上清液,補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。
c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 3) 細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例;a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液,裝入無(wú)菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無(wú)血清細(xì)胞凍存液,使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產(chǎn)品:
Miz1/ZNF60: 鋅指蛋白60抗體 人低侵襲性脈絡(luò)膜黑色素素瘤細(xì)胞;OCM-1A
SHZ-88大鼠癌細(xì)胞 Breast cancer cells of SHZ-88 rats DMEM培養(yǎng)基+10%FBS 大鼠乙酰酯酶(AChE)ELISA試劑盒 Ferritin 鐵蛋白 96T
MYO6: 肌球蛋白6抗體 IL22RA2 Others Human 人 IL22BP / IL22RA2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
氣管上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) 大鼠乙酰酯酶(AChE)ELISA試劑盒 Beta2-MG β2-微球蛋白 96T
Musclin: 肌肉素抗體 倉(cāng)鼠/小鼠雜交瘤細(xì)胞;145-2C11
EFNB3 Others Rat 大鼠 Ephrin-B3 / EFNB3 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 人抗SS-A/Ro抗體ELISA 試劑盒 PACAP(6-38 Peptide) 腺苷酸環(huán)化酶激活肽6-38 0.5mg
Heparanase 1: 乙酰肝素酶抗體 CL-0398NCI-H2452(人間皮瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
U373細(xì)胞,人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞系 福氏志賀氏菌(Shigella flexneri) 人無(wú)色素睫狀上皮細(xì)胞RNAHNPCEpiC miRNA5 μg 人抗sp100抗體(sp100)ELISA 試劑盒 PACAP/VIP receptor 腺苷酸環(huán)化酶激活肽/血管活性腸肽受體(抗原) 0.5mg
Centromeric histone H3-like protein-2: 組蛋白H3樣蛋白抗體 HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/Solomon Islands/3/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人癌細(xì)胞;SK-BR-3 人抗Sc1-70抗體(Sc1-70-Ab)ELISA 試劑盒 PACAP receptor-I 腺苷酸環(huán)化酶激活肽受體(抗原) 0.5mg
H1人胚胎干細(xì)胞H1 (WA01)VEGFA Protein Rat 重組大鼠 VEGF164 / VEGFA 蛋白 大鼠環(huán)腺苷二0酸核糖水解酶(cADPRH)ELISA試劑盒 IL-16 大鼠白介素16 96T
PI 3 Kinase p85 beta: 0脂酰肌醇激酶p85β抗體 AKT3 Others Human 人 AKT3 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
HT-29 人結(jié)腸癌細(xì)胞 大鼠環(huán)0腺苷(cAMP)ELISA試劑盒 LFA-3/CD58(Mouse lymphocyte function associated antigen 3) 小鼠淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原3 96T
phospho-PIK3R2(Tyr467): 0酸化0脂酰肌醇激酶p85β抗體 LoVo細(xì)胞,人結(jié)腸癌細(xì)胞 HEK293,人胚腎上皮細(xì)胞,293A細(xì)胞 腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
IFNGR1 Others Mouse 小鼠 IFNGR1 / CD119 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 大鼠環(huán)0酸腺苷(cAMP)ELISA試劑盒 EMA IgA(Human anti-Endomysial Antibody IgA) 人抗肌內(nèi)膜抗體 CL-0080WB-F344(大鼠肝上皮樣干細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
三、培養(yǎng)注意事項(xiàng)
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū),了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題,責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。
3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題,部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。
4. 貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞,再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?,個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞 的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問(wèn)題解決。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。
8. 備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞,請(qǐng)換用按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。 收到細(xì)胞后第一次傳代建議 1:2 傳代 。
9. 注意: 1:2 傳代就是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè) T25 瓶或者 2 個(gè) 6cm 皿。不是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè)10cm 皿。