更新時(shí)間:2024-11-16
kyse150人食管鱗癌細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:phospho-FXYD1 (Ser88): 0酸化0酸神經(jīng)膜抗體 COS-7L, 非洲綠猴腎成纖維細(xì)胞 其它hMSC-BM-c 人類骨髓間質(zhì)干細(xì)胞(hMSC-BM) 500,000cells 小鼠腦膜細(xì)胞MMenC 兔核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISA試劑盒 Goat Anti-rat IgG/Cy3 Cy3標(biāo)記的羊抗大鼠IgG
公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷!
1、細(xì)胞傳代:
1)細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的 80%面積時(shí),棄 25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用 PBS 清洗細(xì)胞一次;
2)添加 0.25%消化液約 1ml 至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后加入 5ml 培養(yǎng)
液終止消化,再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至 15ml 離心管中,1000rpm 離心 5min;
3)棄上清,沉淀細(xì)胞用 1-2ml 培養(yǎng)基重懸,然后按 1:2 比例進(jìn)行分瓶傳代,最后放入 37℃,5%CO2細(xì)胞
培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
kyse150人食管鱗癌細(xì)胞 | 1×106 | P-X817 |
一、商品介紹:
產(chǎn)品名稱 | kyse150人食管鱗癌細(xì)胞 |
種屬 | 人 |
細(xì)胞別稱 | KYSE 150; KYSE150; Kyse150; KY150;人食管鱗癌細(xì)胞 |
年齡性別 | 女性,49歲 |
生長特性 | 貼壁生長 |
組織來源 | 食管 |
細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
背景簡介 | 根據(jù)一名49歲日本女性接受放療后從上(宮頸)食管切除的低分化食管鱗狀細(xì)胞癌(腫瘤侵犯鄰近結(jié)構(gòu))建立;被描述為攜帶擴(kuò)增的癌基因,c-erb-B(8x)和細(xì)胞周期蛋白D1(4x),并在裸鼠中產(chǎn)生腫瘤。 |
生物安全等級 | 1 |
細(xì)胞規(guī)格 | 1×106 |
支原體檢測 | 無 |
基因表達(dá)情況 | |
保藏機(jī)構(gòu) | DSMZ; ACC-375 |
培養(yǎng)基 | 48.5%RPMI-1640+48.5%F-12+2% FBS+1% P/S |
培養(yǎng)條件 | 氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃ |
凍存條件 | 無血清凍存液,液氮儲存 |
倍增時(shí)間 | ~13.7小時(shí) (PubMed=1728357); 23小時(shí) (PubMed=25984343); |
2、細(xì)胞凍存:
1)細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的 80%面積時(shí),棄 25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用 PBS 清洗細(xì)胞一次;
2)添加 0.25%消化液約 1ml 至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終
止消化,輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至 15ml 離心管中,1000rpm 離心 5min;
3)用適量的凍存液(FBS:DMSO=9 :1)重懸細(xì)胞,并放置于凍存管中;
4)先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃過夜,24h 后轉(zhuǎn)入液氮中進(jìn)行長期保存。使用程序
降溫盒可直接放入-80℃。
二、細(xì)胞培養(yǎng)操作
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10 cm皿中,加入約8 mL培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,使消化液浸潤所有細(xì)胞,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min(視細(xì)胞情況而定),然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中,1000 rpm離心5 min,棄去上清液,補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。
c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 3) 細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例;a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液,使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識。將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產(chǎn)品:
MGLUR3: 代謝型谷酸受體-3抗體 小鼠肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞;P815
IL1RN Protein Human 重組人 IL-1RA / IL1RN 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) 大鼠網(wǎng)膜素(omein)ELISA試劑盒 M-AChR 大鼠毒蕈堿型乙酰受體 96T
CXCL2: 巨噬細(xì)胞炎癥蛋白2( GROβ)抗體 RSV-G Others Respiratory syncytial virus/RSV 人類呼吸道合胞病毒 hRSV (A, rsb1734) glycoprotein G / RSV-G 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
小鼠淋巴成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 大鼠網(wǎng)膜素(omein)ELISA 試劑盒 TLR-9/CD289(Mouse Toll-like receptor 9) 小鼠Toll樣受體9 96T
Metallothionein: 金屬硫蛋白抗體 KB細(xì)胞,口腔表皮樣癌細(xì)胞 人食管癌細(xì)胞,KYSE510細(xì)胞 家貓腎細(xì)胞;CATK1
CXCL10 Protein Human 重組人 CXCL10 / Crg-2 蛋白 人補(bǔ)體蛋白4(C4)ELISA 試劑盒 LH/CG Receptor(Luteinizing Hormone/Choriogonadotropin Receptor) 人促黃體生成素受體抗原 0.5mg
IQCE: IQCE蛋白抗體 HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人腸動脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 人補(bǔ)體蛋白3(C3)ELISA 試劑盒 L-HDC (L-Histidine decarboxylase) L-組酸脫羧酶抗原 0.5mg
IBDV: 雞傳染性法氏囊病病毒抗體 猴脈絡(luò)膜-視網(wǎng)膜(內(nèi)皮)細(xì)胞;RF/6A 膠質(zhì)瘤細(xì)胞,SHG44細(xì)胞 RD(惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞)
ORM2 Others Human 人 ORM2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 人補(bǔ)體7(C7)ELISA 試劑盒 LIF peptide 白血病抑制因子抗原 0.5mg
kyse150人食管鱗癌細(xì)胞體細(xì)胞;HEL 人小腸平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 大鼠釋放激素(GH)ELISA試劑盒 SEP1(Human selenoprotein 1) 人硒蛋白1 96T
phospho-Rb (Ser249): 0酸化視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤相關(guān)蛋白1抗體 卵巢顆粒細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
人海馬神經(jīng)元 大鼠釋放激素(GH)ELISA 試劑盒 SAA3(Human serum amyloid A3) 人血清淀粉樣蛋白A3 96T
Phospho-Rb (Ser608): 0酸化視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤相關(guān)蛋白1抗體 NRP1 Others Cynomolgus 食蟹猴 Neuropilin-1 / NRP1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
PC-3 人前列腺癌細(xì)胞 大鼠促?;鞍?span>(ASP)ELISA試劑盒 Gbp4(Human guanylate nucleotide binding protein 4) 人鳥苷酸結(jié)合蛋白4 96T
三、培養(yǎng)注意事項(xiàng)
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時(shí)和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。
3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。
4. 貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞,再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時(shí)和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞 的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。
8. 備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請換用按照說明書細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。 收到細(xì)胞后第一次傳代建議 1:2 傳代 。
9. 注意: 1:2 傳代就是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè) T25 瓶或者 2 個(gè) 6cm 皿。不是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè)10cm 皿。