ELISA實驗中血清的采集、處理和保存;
1、 真空采血針采集2ml新鮮血液,加入無菌試管中;
2、 采血后室溫靜置1小時;
3、 將采集血液用離心機4℃,2500rpm離心10min,,將離心好的勻漿留上清,棄下面沉淀。
4、 取上清。 分裝凍存?zhèn)溆茫?/p>
2-8℃下,可放置保存24-48小時;
-20℃下,可放置保存1個月;
-70℃下,可放置保存6個月;
5、 根據(jù)你的實驗需要,取適量上清夜進行各種ELISA測定。
大部分ELISA檢測均以血清為標(biāo)本。血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集,應(yīng)注意避免溶血,紅細胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì),以HRP為標(biāo)記的 ELISA測定中,溶血標(biāo)本可能會增加非特異性顯色。此外還應(yīng)避免細菌污染,因為菌體中可能含有含有內(nèi)源性HRP,也會產(chǎn)生假陽性反應(yīng)。血清標(biāo)本宜在新鮮 時檢測。如在冰箱中保存過久,其中的可發(fā)生聚合,在間接法ELISA中可使本底加深。