更新時間:2024-11-16
蒲公英PCR鑒定試劑盒說明書公司相關(guān)產(chǎn)品 馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(USP) 乙酸-α-萘酯830-81-9 α-Napthyl acetate 馬鈴薯葡萄糖瓊脂(含) Potato Dextrose Agar(Chloramphenicol) 250乙酸-β-萘酯1523-11-1 β-Napthyl acetate 馬鈴薯葡萄糖瓊脂
特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)地黃保守序列設(shè)計的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。
6. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
產(chǎn)品名稱 | 蒲公英PCR鑒定試劑盒說明書 |
英文名稱 | taraxaci |
貨號 | BH-P99469 |
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照《食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗阪崎腸桿菌檢驗要求進行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
注:上述樣品建議經(jīng)過增菌后,收集培養(yǎng)物用于檢測。
二、DNA提取:
可采用PCR試劑盒配備的DNA抽提液,按以下說明進行DNA核酸的粗提。也可采購上海澤葉生物科技有限公司生產(chǎn)的DNA提取試劑盒(過柱法-熒光配套)或其他合適的商業(yè)化產(chǎn)品,并按照相應(yīng)試劑盒說明進行操作。
1、液體培養(yǎng)物:取液體培養(yǎng)物100μL加到1.5mL無菌離心管中,8000rpm離心3min,盡量吸棄上清,加入50μL DNA抽提液充分混勻,100℃恒溫10min,13000rpm離心3min,取上清5μL進行PCR反應(yīng)。
2、固體培養(yǎng)物:挑取單克隆菌落與50μL DNA抽提液充分混勻,100℃恒溫10min,13000rpm離心3min,取上清5μL進行PCR反應(yīng)。
3、糞便樣品:挑取米粒大小糞便于滅菌離心管中,加入0.5mL生理鹽水,振蕩混勻,13000rpm離心3分鐘,棄上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻,100℃恒溫10min,13000rpm離心3min取上清5μL進行PCR反應(yīng)。
4、其他液體標本:取標本2-3mL,13000rpm離心3min,棄上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻,100℃恒溫10min,13000rpm離心3min取上清5μL進行PCR反應(yīng)。
注:陽性對照和陰性對照為已經(jīng)抽提好的核酸(無需提取),直接取5μL加入到反應(yīng)體系中即可。由于陽性對照濃度較高,建議在樣品制備區(qū)域加入陽性對照。
實驗流程:
1. 整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。
儲存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
GRK6 Others Human 人 GRK6 / GPRK6 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 舒巴坦酸(標準品)Sulbactam Acid質(zhì)量規(guī)格:≥98%,標準品
tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-4B3沙蟾毒精(標準品)Arebufagin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
SH-SY5Y細胞,神經(jīng)母細胞瘤細胞 人膽囊癌細胞,GBC-SD細胞 CL-0048Ca Ski(人上皮細胞)5×106cells/瓶×2坦西莫司,脂化物Temsirolimus;CCI-779;NSC 683864質(zhì)量規(guī)格:>98%,選擇性的mTOR抑制劑
人APP-PS1(C410Y)雙基因轉(zhuǎn)染細胞株;7WCY1.0富馬酸盧帕他定Rupatadine fumarate質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
IL32 Others Human 人 Ierleukin-32 / IL-32 (isoform alpha) 人細胞裂解液 (陽性對照) 富馬酸盧帕他定(標準品)Rupatadine fumarate質(zhì)量規(guī)格:>99%,標準品
IL23R Others Human 人 IL23R / IL23 Receptor 人細胞裂解液 (陽性對照) 雌激素酮-d4Estrone-d4質(zhì)量規(guī)格:美國進口
腎動脈內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)Clindamycin質(zhì)量規(guī)格:美國進口
CGM1細胞,人EB病毒轉(zhuǎn)化的B細胞 615小鼠滑膜肉瘤瘤株,ZM755細胞 人腦血管周細胞裂解物HBVCL4'-羥基苯偶氮基-4-羧酸水合物(>98.0%(HPLC)(T))4'-Hydroxyazobenzene-4-carboxylic Acid Hydrate質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T)
NCI-H716(人結(jié)直腸腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2羧基甲氧基胺半鹽酸鹽(>98.0%(T))Carboxymethoxylamine Hemi質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)
CA46(人Butts瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0022AGS(人胃腺癌細胞)5×106cells/瓶×2 小鼠瘤細胞(NK靶細胞);YAC-1吉拉德試劑 P(>95.0%(T))Girard's Reagent P質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(T)
Pig MSC豬骨髓間質(zhì)干細胞 Pig MSC of porcine bone marrow mesenchymal stem cells DMEM低糖+10% FBS+glutamin正十二烷基苯(analytical standard,≥99.5%(GC))質(zhì)量規(guī)格:analytical standard,≥99.5%(GC)1-Phenyldodecane
IL6 Protein Rat 重組大鼠 IL6 / Ierleukin-6 蛋白2-苯乙醇(GC,>99.5%(GC))質(zhì)量規(guī)格:GC,>99.5%(GC)2-Phenylethal
RM1(大鼠肌肉成纖維樣細胞) 5×106cells/瓶×2 PC-12未分化(大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤)1,3-(Standard for GC,≥99.5%(GC))質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC,≥99.5%(GC)1,3-Propanediol
CL-0132KG-1(人急性骨髓性白血病細胞)5×106cells/瓶×2α-蒎1(Standard for GC,≥99.0%)質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC,≥99.0%(−)-α-Pinene
TNFRSF14 Others Cymolgus 食蟹猴 HVEM / TNFRSF14 人細胞裂解液 (陽性對照) 1,2,3,4-四氫萘(THN)(標準品)質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,≥99.5%(GC)1,2,3,4-Tetrahydronaphthalene
蒲公英PCR鑒定試劑盒說明書BTC Protein Mouse 重組小鼠 BTC / Betacellulin 蛋白 (His & Fc 標簽)三乙基嶙酸鹽,英文名或英文縮寫:TEP,級別:高,97%,規(guī)格:500克
293E(人胚腎細胞(EBNA1基因修飾)) 5×106cells/瓶×2 原代神經(jīng)膠質(zhì)細胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基Many types of cells包裝:500/250/100ml Bemyl,95% 17804-35-2 5G 通用試劑
人絨毛膜內(nèi)皮細胞HVCEC流醋 litxium sulfctq mohydrctq