根據(jù)酶標板與蛋白和其它分子結合才干的不同,又分為高結合力、中結合力和氨基化等。
1、高結合力
此種酶標板,表面經處理后,其蛋白結合才干大大增強,可達300~400ng IgG/cm2,首要結合的蛋白分子量>10kD。運用該類酶標板可進步敏感性,并可相對減少包被蛋白的濃度和用量,不足之處為較易發(fā)生非特異性反應??乖蚩贵w包被后,以非離子去污劑無法有效地封閉未結合蛋白的部位,需運用蛋白作為封閉劑。
2、中結合力
此類酶標板經表面疏水鍵與蛋白結合,適宜作為分子量>20kD的大分子蛋白的固相載體,其蛋白結合才干為200~300ng IgG/cm2。由于該類酶標板所具有的僅與大分子結合的特性,適用于作為未純化抗體或抗原的固相載體,可下降潛在的非特異性穿插反應。該類板可以慵懶蛋白或非離子去污劑作為封閉液。
ELISA試劑盒實驗
3、氨基化
ELISA試劑盒這種酶標板經表面改性處理后具有帶正電荷的氨基,其疏水鍵由親水鍵代替。該類酶標板適宜作為小分子蛋白的固相載體。運用適宜的緩沖液和pH值,其表面可通過離子鍵與帶負電荷的小分子結合。由于其表面的親水特性和可通過其它交聯(lián)劑共價結合的才干,可用于固定溶于Triton-100、Tween 20等去污劑的蛋白分子。該類板的缺陷為由于下降了疏水性,一部分蛋白分子無法結合;此外,其表面需有效地封閉。由于親水和共價的表面特性,運用的封閉液有必要可以與非反應性氨基基團和所挑選的交聯(lián)劑中任何功用基團發(fā)生作用。