更新時(shí)間:2024-12-07
腫瘤壞死因子-a(TNF-a)Elisa試劑盒應(yīng)重復(fù)測(cè)試,排除偶然誤差。重要樣品,如含急性中毒物質(zhì)或可能會(huì)對(duì)后期處理帶來(lái)較大社會(huì)影響或較大經(jīng)濟(jì)損失的樣品,應(yīng)注意留樣,并將樣品送實(shí)驗(yàn)室進(jìn)一步確證。
服務(wù)承諾:
一、質(zhì)量保證,有問(wèn)題免費(fèi)包換;
二、提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)為客戶提供來(lái)樣檢測(cè)服務(wù),限度實(shí)驗(yàn)結(jié)果的有效性;
三、提供全程技術(shù)指導(dǎo)。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 用途 |
腫瘤壞死因子-a(TNF-a)Elisa試劑盒 | 96T/48T | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
試劑和樣本的控制方法:
一、試劑
1.試劑的選擇:國(guó)家明確要求要采用批批檢定的形式對(duì)ELISA試劑嚴(yán)格把關(guān),我司嚴(yán)格按照進(jìn)行生產(chǎn),已獲得國(guó)家承認(rèn)的“三證”,每一個(gè)產(chǎn)品都有對(duì)應(yīng)的生產(chǎn)批號(hào),只要客戶提前下單,我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品,不必?fù)?dān)心會(huì)有過(guò)期的試劑。我司的試劑,值得您選擇。
2.試劑的準(zhǔn)備:先將試劑盒先從冰箱中拿出來(lái),在室溫下放置20-30 min后,再進(jìn)行測(cè)定,使試劑盒在使用前與室溫平衡,這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所需的溫度,以滿足后面的測(cè)定需求。
二、樣本
1.內(nèi)源性干擾因素:包括類(lèi)風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等;
類(lèi)風(fēng)濕因子的控制方法:
①用F(ab)2替代完整的IgG;
②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理;
③檢測(cè)抗原時(shí),可用加入到標(biāo)本稀釋液中使RF降解。
檢測(cè)程序:
1. 加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品 100ul ,將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次,向?yàn)V紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ,置 37 ℃ 暗處反應(yīng)15 分鐘。
8. 每孔加入100ul 終止液混勻。
9. 30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在 45 0 nm 處測(cè) 吸光值。
注意事項(xiàng):
1加樣:
①實(shí)驗(yàn)樣本過(guò)多時(shí),可分批次操作,以減少實(shí)驗(yàn)時(shí)間延長(zhǎng)造成的誤差;
②加酶試劑后,用吸水紙吸干孔外試劑;
③作定量試驗(yàn)時(shí),使用加樣器加注試劑,并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性,此外,要做到一份樣本一個(gè)移液頭,防止交叉污染。
2.溫育:
①如有兩種溫度,盡量使用較低的溫育溫度、較長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間的條件;
②用1個(gè)小溫度計(jì)放置在板孔反應(yīng)液中測(cè)量觀察;
③96孔板周?chē)着c中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會(huì)造成“邊緣效應(yīng)”,因此盡量采用水??;
3.洗板:
①手工洗板時(shí),拍板時(shí)要垂直,避免交叉污染,用力不能過(guò)猛,防止抗原抗體復(fù)合物脫離;
②洗板機(jī)洗板時(shí)應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢,若被雜物堵塞時(shí)可用注射器針頭挑出;
③為了洗滌效果好,實(shí)驗(yàn)室可采用機(jī)器與人工洗滌相結(jié)合的方法,在機(jī)器洗滌后再進(jìn)行人工洗板1-2次,或適當(dāng)增加洗板的次數(shù);
4.顯色:
ELISA試劑盒中,如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物,則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液;如以鄰苯二胺(OPD)為底物,則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,但A、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械。
5.判定:
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成,定性測(cè)定用肉眼判讀試驗(yàn)結(jié)果時(shí),反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm;定量測(cè)定時(shí)用酶標(biāo)儀讀取結(jié)果,酶標(biāo)儀不應(yīng)置于陽(yáng)光或強(qiáng)光照射下,需先預(yù)熱15-30 min再進(jìn)行測(cè)試。
生長(zhǎng)分化因子3(GDF3)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Growth Differentiation Factor 3 (GDF3) 96T Homo sapiens (Human)
生長(zhǎng)分化因子3(GDF3)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Growth Differentiation Factor 3 (GDF3) 96T Mus musculus (Mouse)
生長(zhǎng)分化因子3(GDF3)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Growth Differentiation Factor 3 (GDF3) 96T Rattus norvegicus (Rat)
生長(zhǎng)分化因子1(GDF1)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Growth Differentiation Factor 1 (GDF1) 96T Homo sapiens (Human)
生長(zhǎng)分化因子1(GDF1)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Growth Differentiation Factor 1 (GDF1) 96T Mus musculus (Mouse)
生長(zhǎng)分化因子1(GDF1)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Growth Differentiation Factor 1 (GDF1) 96T Rattus norvegicus (Rat)
干擾素誘導(dǎo)T-細(xì)胞α亞族趨化劑(ITαC)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interferon Inducible T-Cell Alpha Chemoattractant (ITaC) 96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
干擾素誘導(dǎo)T-細(xì)胞α亞族趨化劑(ITαC)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interferon Inducible T-Cell Alpha Chemoattractant (ITaC) 96T Homo sapiens (Human)
干擾素誘導(dǎo)T-細(xì)胞α亞族趨化劑(ITαC)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interferon Inducible T-Cell Alpha Chemoattractant (ITaC) 96T Mus musculus (Mouse)
干擾素誘導(dǎo)T-細(xì)胞α亞族趨化劑(ITαC)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interferon Inducible T-Cell Alpha Chemoattractant (ITaC) 96T Rattus norvegicus (Rat)
趨化因子C-基元配體2(XCL2)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Chemokine C-Motif Ligand 2 (XCL2) 96T Homo sapiens (Human)
VEGF共調(diào)節(jié)趨化因子1(VCC1)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for VEGF Co Regulated Chemokine 1 (VCC1) 96T Homo sapiens (Human)
VEGF共調(diào)節(jié)趨化因子1(VCC1)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for VEGF Co Regulated Chemokine 1 (VCC1) 96T Mus musculus (Mouse)
VEGF共調(diào)節(jié)趨化因子1(VCC1)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for VEGF Co Regulated Chemokine 1 (VCC1) 96T Rattus norvegicus (Rat)
白細(xì)胞介素24(IL24)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interleukin 24 (IL24) 96T Homo sapiens (Human)
白細(xì)胞介素24(IL24)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interleukin 24 (IL24) 96T Mus musculus (Mouse)
白細(xì)胞介素24(IL24)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interleukin 24 (IL24) 96T Rattus norvegicus (Rat)
白介素20(IL20)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interleukin 20 (IL20) 96T Homo sapiens (Human)
白介素29(IL29)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interleukin 29 (IL29) 96T Homo sapiens (Human)
白介素22(IL22)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interleukin 22 (IL22) 96T Homo sapiens (Human)
白介素22(IL22)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interleukin 22 (IL22) 96T Mus musculus (Mouse)
生長(zhǎng)分化因子15(GDF15)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Growth Differentiation Factor 15 (GDF15) 96T Homo sapiens (Human)
生長(zhǎng)分化因子15(GDF15)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Growth Differentiation Factor 15 (GDF15) 96T Mus musculus (Mouse)
生長(zhǎng)分化因子15(GDF15)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Growth Differentiation Factor 15 (GDF15) 96T Rattus norvegicus (Rat)
ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白B10(ABCB10)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for ATP Binding Cassette Transporter B10 (ABCB10) 96T Homo sapiens (Human)
S100鈣結(jié)合蛋白(S100)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for S100 Calcium Binding Protein (S100) 96T Homo sapiens (Human)
S100鈣結(jié)合蛋白B(S100B)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for S100 Calcium Binding Protein B (S100B) 96T Homo sapiens (Human)
硫氧化還原蛋白(Trx)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Thioredoxin (Trx) 96T Homo sapiens (Human)Anti-CD5 CD5抗體 0.1ml
Anti-CD54/ICAM-1 細(xì)胞間粘附分子-1抗體 0.1ml
Anti-ICAM-2/CD102 細(xì)胞間粘附分子-2抗體 0.2ml
Anti-CD56/NCAM1 神經(jīng)細(xì)胞粘附分子1抗體 0.1ml
Anti-CD62L L選擇素抗體 0.2ml
anti-E-Selectin E選擇素抗體 0.1ml
Anti-CD68 CD68抗體 0.1ml
Anti-CD73 胞漿-5´-核苷酸酶-Ⅱ抗體 0.2ml
Anti-CD79A/IGBP-1 免疫球蛋白結(jié)合蛋白-1抗體 0.2ml
Anti-CD8 鼠抗人CD8單克隆抗體 0.1ml
Anti-CD86/B7-2 CD86抗體 0.1ml
Anti-CDK1 周期素依賴性激酶1抗體 0.1ml
Anti-CDK2 周期素依賴性激酶2抗體 0.1ml
Anti-CDK4 周期素依賴性激酶4抗體 0.1ml
Anti-CDK5 周期素依賴性激酶5抗體 1ml
Anti-CDK6 周期素依賴性激酶6抗體 0.2ml
Anti-CDK7 周期素依賴性激酶7抗體 1ml
Anti-CDK8 周期素依賴性激酶8抗體 0.2ml
Anti-Cdkn1c/p57/Kip2 周期蛋白依賴激酶抑制因子1C抗體 0.2ml
Anti-CDR/YKL-40 軟骨糖蛋白39抗體 0.1ml
Anti-CEA 人癌胚抗原抗體 0.2ml
Anti-CEAcam8/CD67 癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞粘附分子8抗體 0.2ml
Anti-C-erbB-2 c-erbB-2抗體 0.1ml
Anti-C-erbB-4/HER4/erbB-4 c-erbB-4癌基因抗體 0.1ml
腫瘤壞死因子-a(TNF-a)Elisa試劑盒Anti-c-fos 即刻早期基因抗體 0.1ml
anti-CFTR 囊性纖維化跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)調(diào)節(jié)因子抗體 0.1ml
Anti-CGA 嗜鉻粒素A抗體 0.2ml
Anti-CGB 嗜鉻粒素B抗體 0.2ml兔子脫氫表雄酮硫酸酯(DHEA-S)Elisa試劑盒
操作步驟:
A.夾心法,一般的操作步驟為:
?將具有專(zhuān)一性的抗體固著于塑膠孔盤(pán)上,完成后洗去多余抗體;
?加入待測(cè)檢體,檢體中若含有待測(cè)的抗原,則其會(huì)與塑膠孔盤(pán)上的抗體進(jìn)行專(zhuān)一性鍵結(jié);
?洗去多余待測(cè)檢體,加入另一種對(duì)抗原專(zhuān)一的一次抗體,與待測(cè)抗原進(jìn)行鍵結(jié);
?洗去多余未鍵結(jié)一次抗體,加入帶有酶的二次抗體,與一次抗體鍵結(jié);
?洗去多余未鍵結(jié)二次抗體,加入酶底物使酵素呈色,以肉眼或儀器讀取呈色結(jié)果;
B.間接法,一般的操作步驟為:
?將已知的抗原固著于塑膠孔盤(pán)上,完成后洗去多余的抗原。
?加入待測(cè)檢體,檢體中若含有待測(cè)的一次抗體,則其會(huì)與塑膠孔盤(pán)上的抗原進(jìn)行專(zhuān)一性鍵結(jié)。
?洗去多余待測(cè)檢體,加入帶有酶的二次抗體,與待測(cè)的一次抗體鍵結(jié)。
?洗去多余未鍵結(jié)二次抗體,加入酶底物使酶呈色,藉儀器測(cè)定塑膠盤(pán)中的吸光值,以評(píng)估有色終產(chǎn)物的含量即可測(cè)量待測(cè)抗體的含量。
C.競(jìng)爭(zhēng)法,其操作步驟為:
?將具有專(zhuān)一性的抗體固著于塑膠孔盤(pán)上,完成后洗去多余抗體
?加入待測(cè)檢體,使檢體中的待測(cè)抗原與塑膠孔盤(pán)上的抗體進(jìn)行專(zhuān)一性鍵結(jié)
?加入帶有酶的抗原,此抗原也可與塑膠孔盤(pán)上的抗體進(jìn)行專(zhuān)一性鍵結(jié),由于塑膠孔盤(pán)上固著的抗體數(shù)量有限,因此當(dāng)檢體中抗原的量越多,則帶有酶的抗原可鍵結(jié)的固著抗體就越少,亦即,兩種抗原皆競(jìng)相與塑膠孔盤(pán)上抗體鍵結(jié),即所謂競(jìng)爭(zhēng)法之由來(lái)。
?洗去檢體與帶有酶的抗原,加入酶底物使酶呈色,當(dāng)檢體中抗原量越多,代表塑膠孔盤(pán)內(nèi)留下之帶有酶的抗原越少,顯色也就越淺。