公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷！

一、商品介紹：

二、細(xì)胞培養(yǎng)操作

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)為主。將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10 cm皿中，加入約8 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

    a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。        

    b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤(rùn)所有細(xì)胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min（視細(xì)胞情況而定），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無(wú)菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。        

     c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無(wú)菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。

     b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無(wú)血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。  

三、培養(yǎng)注意事項(xiàng) 

1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。

2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū)，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題，責(zé)任由 客戶(hù)自行承擔(dān)。

3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。

4. 貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

5. 請(qǐng)客戶(hù)用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶(hù)收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?，個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞 的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問(wèn)題解決。

7. 該細(xì)胞僅供科研使用。

8. 備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。     收到細(xì)胞后第一次傳代建議 1：2 傳代 。

9. 注意：  1:2 傳代就是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè) T25 瓶或者 2 個(gè) 6cm 皿。不是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè)10cm 皿。

公司正在出售的產(chǎn)品：

Matrin 3： 核基質(zhì)蛋白3抗體 HNE2, 人鼻咽癌細(xì)胞系 NIH SWISS小鼠胚細(xì)胞,NIH3T3細(xì)胞 A673(橫紋肌瘤細(xì)胞)

GP140 Others HIV 人類(lèi)免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 (group M, subtype CRF07_BC) gp140 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 大鼠游離狀腺原酸(Free-T3)ELISA試劑盒 Mouse Cross-linked Carboxy-terminal telopeptide of type I collagen, I CTP  小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽 96T

MHC class I： 組織相容性復(fù)合體蛋白1抗體 倉(cāng)鼠/小鼠雜交瘤細(xì)胞;145-2C11

PC 61 5.3 [PC 61; PC 61.5.3]雜交瘤細(xì)胞CD25 PC 615.3 [PC 61; PC 61.5.3] hybridoma cell line CD25 DMEM+10% Hyclone 滅活血清 大鼠游離狀腺原酸(Free-T3)ELISA 試劑盒 Fc AlphaR I /CD89(Human Receptor I for the Fc region of immunoglobulin A,Fc AlphaR I )  A Fc段受體Ⅰ 96T

MHC Class II： 組織相容性復(fù)合體蛋白2抗體 CLEC14A Others Mouse 小鼠 CLEC14A / EGFR-5 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

Phospho-HDAC7(Ser155)： 0酸化組蛋白去乙?；?span>7抗體 CD40 Others Canine 狗 CD40 / TNFRSF5 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

兔骨髓間質(zhì)干細(xì)胞 Rabbit bone marrow mesenchymal stem cells 人抗核糖核蛋白抗體(RNP-Ab)ELISA 試劑盒 ATF6(activating transcription factor 6) 活化轉(zhuǎn)錄因子6抗原 0.5mg

phospho-HDAC4 (Ser632)： 0酸化組蛋白去乙酰化酶4抗體 兔主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞;CCC-SMC-2 癌細(xì)胞，MDA-MB-231細(xì)胞 J774A.1細(xì)胞，小鼠單核巨噬細(xì)胞

CD48 Others Rat 大鼠 CD48 / SLAMF2 / BCM1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 人抗核仁纖維蛋白抗體(AFA/snoRNP/U3RNP)ELISA 試劑盒 ATP1b2/Na+K+ ATPase(ATPase, Na+/K+ transporting, beta 2 polypeptide) ATP酶通道蛋白抗原 0.5mg

phospho-HDAC7(Ser486)： 0酸化組蛋白去乙?；?span>7抗體 CL-0446SUP-B15(人Ph+急淋白血病細(xì)胞系)5×106cells/瓶×2

CAKI-2人腎透明細(xì)胞癌p70 S6 kinase alpha： 核糖體p70 S6蛋白激酶抗體 SK-OV-3[SKOV-3]細(xì)胞，人卵巢癌細(xì)胞 人支氣管上皮細(xì)胞,HBE細(xì)胞 腦膜細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

F9 Others Mouse 小鼠 Coagulation Factor IX / FIX / F9 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 大鼠肌球蛋白重鏈2(MYH2)ELISA試劑盒 VD  大鼠維生 96T

p53AIP1： p53調(diào)節(jié)凋亡誘導(dǎo)蛋白1抗體 CL-0144LoVo(人大腸癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

COLO 320DM 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞 COLO 320DM human colorectal adenocarcinoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS 大鼠肌球蛋白重鏈1(MYH1)ELISA試劑盒 IL-23(Mouse Interleukin 23) 小鼠白介素23 96T

PTRH2： Bcl-2轉(zhuǎn)錄抑制因子1抗體 TEK Others Human 人 Tie2 / CD202b 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)