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Klenow Fragment(exo-)

更新時(shí)間:2024-12-06

簡(jiǎn)要描述:

Klenow Fragment(exo-)是 DNA 聚合酶 I 的 N末端截短物,它保留了 DNA 聚合酶活性,但失去了 5′→3′核酸外切酶活性。該酶進(jìn)一步經(jīng)突變(D355A,E357A)去除了其 3′→5′的核酸外切酶活性。

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公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷!

商品屬性

貨號(hào)

產(chǎn)品名稱(chēng)

規(guī)格

P-PR1291

Klenow Fragment(exo-)

1000U

產(chǎn)品介紹:

Klenow 片段(3′→5′ exo-)是 DNA 聚合酶 I 的 N末端截短物,它保留了 DNA 聚合酶活性,但失去了 5′→3′核酸外切酶活性。該酶進(jìn)一步經(jīng)突變(D355A,E357A)去除了其 3′→5′的核酸外切酶活性。因此該 DNA 聚合酶無(wú)任何外切酶活性,僅包含了 DNA 聚合酶活性,廣泛用于標(biāo)記探針制備、cDNA 第二條鏈的合成等建庫(kù)試驗(yàn)。
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單位定義
一個(gè)活力單位即在 37°C 條件下,30 分鐘內(nèi)催化 10 nmoldNTP 的摻入反應(yīng)成為酸不溶性物質(zhì)所需的酶量。該酶保存液中含有 50%甘油。
10×Klenow Buffer: 500 mM Tris-HCl (pH 8.0 at 25 °C), 50mM MgCl2, 10 mM DTT. 該酶兼容 PCR Buffer 和內(nèi)切酶Buffer。
應(yīng)用:
(1)用隨機(jī)引物制備探針
(2)隨機(jī)引物法標(biāo)記
(3)cDNA 第二條鏈的合成
(4)該酶不能用于產(chǎn)物平端不齊
失活:
75°C,20min 失活。
儲(chǔ)存:-20℃可保存 3 年。
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95°C 5min 冰上放置 5min。
2. 聚合反應(yīng)
加入 0.5 μl Klenow Fragment(exo-),混合均勻。37°C 反應(yīng) 15min,75°C 20min 失活。

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