更新時間:2024-12-05
柯薩奇病毒A6型和A10型核酸檢測試劑盒公司相關(guān)產(chǎn)品新生牛眼晶體上皮細(xì)胞;NBLE苯駢三氮唑(BTA,1,2,3-苯駢三氮唑)1H-BenzotriazoleAR,分析NCI-H2087細(xì)胞,非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞 逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝的NIH3T3細(xì)胞,PA317細(xì)胞 CM-R095大鼠成年表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞*培養(yǎng)基100mLBetahistine Di>99%,BRRL95-2(內(nèi)膜癌
訂購信息:
產(chǎn)品名稱:柯薩奇病毒A6型和A10型核酸檢測試劑盒
規(guī)格:50T
編號:BH-P96401
分類:熒光PCR法
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
準(zhǔn)備物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
使用及效果:
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進(jìn)行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
檢測步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL楊梅苷()MyricetrinHPLC≥98%,
PA317細(xì)胞,逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝用的胚胎成纖維細(xì)胞 小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌 豚鼠肺細(xì)胞;GP-F1楊芽黃素()TectochrysinHPLC≥98%,
CCL17 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CCL17 / TARC 蛋白 (His 標(biāo)簽)洋川芎內(nèi)酯A()Senkyunolide A鑒別用,
NG108-15(小鼠神經(jīng)細(xì)胞瘤與大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤之融合細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 FAM20B / Gxk1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 氧化槐果堿()OxysophocarpineHPLC≥98%,
雜交瘤(B類);Z51B3C10H12A12G2F7E7BelinostatBelinostat (PXD101)>98%
小鼠T細(xì)胞;Cl.Ly1+2-/9 小鼠肝動脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL大內(nèi)皮素-1(1-38),Big Endothelin-1 (1-38), human>95%,BR
MLF, 小鼠成纖維細(xì)胞 Mouse大內(nèi)皮素-1 (1-39),豬Big Endothelin -1 (1-39),porcine>95%,BR
FZD10 Others Mouse 小鼠 FZD10 / Frizzled-10 / CD350 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 腦鈉素-32,大鼠BNP-32, rat>95%,BR
結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;LS 174T [LS174T]鈴蟾肽Bombesin>95%,BR
TLR2 Others Rat 大鼠 TLR2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 緩激肽Bradykinin>95%,BR
柯薩奇病毒A6型和A10型核酸檢測試劑盒MSR1 Others Rat 大鼠 MSR1 / SCARA1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 磺,英文名或英文縮寫:Sulfamer,級別:BR,95-100%,規(guī)格:100毫升
腎實(shí)質(zhì)細(xì)胞Many types of cells 5 × 105方(1ml)3,3-二安基聯(lián)本安言醋鹽 3,3',4,4'-Biphqnyltqtrcminq tqtrcxy7nochloridq
3T6swiss細(xì)胞,小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 癌細(xì)胞,M453細(xì)胞 過氧化物酶分析試劑盒GPXβ-蛋白組學(xué)級透明無色液體RT不sigma
SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞;COS-1脫葉靈,英文名或英文縮寫:TDZ,級別:高,99%,規(guī)格:50毫克
IL13RA2 Others Human IL13RA2 / IL13R 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 7778-80-5鉀potewwium sulfate;Tartarus vitriolatus;Salt of leMery