更新時(shí)間:2024-12-05
胡寧病毒核酸檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)公司相關(guān)產(chǎn)品骨肉瘤細(xì)胞;HOS()Alkyldimethylbenzylammonium chloride供HPLC法檢查用和容量法含量測(cè)定用成纖維細(xì)胞(HMF)(5×105)()Alkyldimethylbenzylammonium chloride含量測(cè)定用CM-H112脂肪細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL()Neostigmin
訂購(gòu)信息:
產(chǎn)品名稱:胡寧病毒核酸檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)
規(guī)格:50T
編號(hào):BH-P96486
分類:熒光PCR法
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門(mén)。
準(zhǔn)備物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說(shuō)明書(shū) 1份
使用及效果:
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無(wú)交叉反應(yīng),無(wú)非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡(jiǎn)便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè);
◇高通量:多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。
PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過(guò)選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測(cè)中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無(wú)放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
檢測(cè)步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽(yáng)性對(duì)照),每個(gè)測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽(yáng)性對(duì)照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。
長(zhǎng)尾綠猴腎細(xì)胞;4647氧化鑭(>99%,EP)Lanthanum(III) oxide>99%,EP
TEK Others Human Tie2 / CD202b / TEK 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 氯化鎂六水(分子生物學(xué))Magnesium chloride, hexahydrate>99%,分子生物學(xué)級(jí)
CL-0217SP2/0(小鼠骨髓瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2醋酸錳四水Manganese (II) acetate, tetrahydrate>98%,BC
LX-2, 肝星形細(xì)胞株 小鼠垂體瘤細(xì)胞(分泌促生長(zhǎng)激素分泌激素),GT1.1細(xì)胞 OK(負(fù)鼠(opossum)腎細(xì)胞)神經(jīng)氨酸酶(≥10 units/ mg )Neuraminidase from Clostridium perfringens≥10 units/ mg
腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞;786-O [786-0]乙酸鎳四水(>98%,BC)Nickel (II) acetate, tetrahydrate>98%,BC
小鼠成骨細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mLDL-α-羥基戊二酸二鈉98%,GC,進(jìn)分sigma 94577DL-α-Hydroxyglutaric acid di salt
P388D1小鼠樣瘤細(xì)胞 P388D1 mouse lymphoid tumor cells RPMI-1640(GIBCO)+90%馬血清+10%FBS地美溴胺>99%,BRDemecarium Bromide
IL12B Protein Human 重組 IL12B / P40 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)喹哪啶紅ARQuinaldine Red
腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞 (HBMEC) ( 5×105 ) 大鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 細(xì)胞名稱(98%)>98%Phenolphthalein
CM-R057大鼠腎系膜細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL四溴酚藍(lán)INDTetrabromophenol blue
胡寧病毒核酸檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)293T細(xì)胞,胚腎T細(xì)胞 卵巢癌細(xì)胞,HO-8910細(xì)胞 心肌細(xì)胞裂解物HCML戈米辛D()>98.0% (LC&T),Gomisin D
SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞;COS-11-甲基>98%1-Methyl Xanthine
IFNA5 Others Human IFNαG / IFNaG / Ierferon alpha-G 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 6-羧基-X-羅丹明>95%6-Carboxy-X- rhodamine; 6-ROX
豚鼠皮膚細(xì)胞;GP-S2西侖吉肽>97%,integrin抑制劑Cilengitide,EMD121974,NSC 707544
IFNA14 Others Mouse 小鼠 IFNA14 / Ierferon alpha-14 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 柴胡皂苷B2()HPLC≥98%,Saikosaponin B2