更新時間:2024-12-03
發(fā)酵支原體PCR檢測試劑盒說明書我司提供PCR試劑盒的類別有流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒、冠狀病毒、輪狀病毒、桿菌、鏈球菌、熱帶病毒等等核酸檢測試劑盒。
發(fā)酵支原體PCR檢測試劑盒說明書組成及試劑配制:
1、 酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 發(fā)酵支原體PCR檢測試劑盒說明書檢測稀釋液B:1×10ml。
樣本采集、存放及運輸:
發(fā)酵支原體PCR檢測試劑盒說明書1、樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,-70℃以下可保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(zui多凍融3次);
3、運輸:采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運輸。
特點優(yōu)勢:
1.特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1抗體 英文縮寫: phospho-AMPK alpha 1 (Ser487)
磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α2抗體 英文縮寫: phospho-AMPK alpha 2 (Ser345)
酸性神經(jīng)酰胺酶1抗體 英文縮寫: ASAH1
粘附調(diào)節(jié)分子1抗體 英文縮寫: ADRM1
氣味結(jié)合蛋白抗體 英文縮寫: Aphrodisin
乙醛脫氫酶2抗體 英文縮寫: ALDH2
膜粘連蛋白10抗體 英文縮寫: Annexin A10
前梯度同源蛋白2抗體 英文縮寫: Anterior Gradient 2
乙醛脫氫酶5抗體 英文縮寫: ALDH1B1
通用轉(zhuǎn)錄因子IIA樣因子抗體 英文縮寫: ALF
自噬相關(guān)蛋白4D抗體 英文縮寫: ATG4D
自噬相關(guān)蛋白9A抗體 英文縮寫: ATG9A
醛縮酶C抗體 英文縮寫: Aldolase C
谷草轉(zhuǎn)氨酶抗體 英文縮寫: Aspartate Aminotransferase
三磷酸腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運蛋白G超家族成員5抗體 英文縮寫: ABCG5
三磷酸腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運蛋白G超家族成員8抗體 英文縮寫: ABCG8
?;摎涿搁L鏈抗體 英文縮寫: ACADL
?;摎涿钢墟溈贵w 英文縮寫: ACADM
酰基脫氫酶短鏈抗體 英文縮寫: ACADS
過氧化物酶?;趸?抗體 英文縮寫: ACOX1
磷酸化細(xì)胞凋亡信號調(diào)節(jié)激酶1抗體 英文縮寫: phospho-ASK1 (Ser1033)
轉(zhuǎn)化生長因子β誘導(dǎo)蛋白3抗體(半和富含核蛋白1) 英文縮寫: AXUD1
有絲分裂激酶A/B/C抗體 英文縮寫: Aurora A+B+C
蛋白激酶ATK抗體 英文縮寫: ATK
發(fā)酵支原體PCR檢測試劑盒說明書長鏈脂肪酸連接酶1/2抗體 英文縮寫: ACSL1
過氧化物酶酰基氧化酶2抗體 英文縮寫: ACOX2
?;D(zhuǎn)移酶1抗體 英文縮寫: ACAT1
磷酸化間變型淋巴瘤激酶抗體