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羅布羅布芽生菌PCR檢測試劑盒說明書

更新時間:2024-12-03

簡要描述:

羅布羅布芽生菌PCR檢測試劑盒說明書是即用型PCR試劑盒的改良產(chǎn)品, 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應(yīng)緩沖液、PCR 增強劑、上樣染料等所有PCR 所需要的成分,用戶只需加入模板和引物即可進(jìn)行PCR 反應(yīng),具有廣泛的用途。

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羅布羅布芽生菌PCR檢測試劑盒說明書組成及試劑配制:
1、 酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、羅布羅布芽生菌PCR檢測試劑盒說明書 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。

樣本采集、存放及運輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
羅布羅布芽生菌PCR檢測試劑盒說明書2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,-70℃以下可保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(zui多凍融3次);
3、運輸:采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運輸。

特點優(yōu)勢:
    1.特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
    2.   重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
    3.   靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
    4.   實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
    5.   優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。

    6.   優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。

反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。

磷酸化原癌基因CBL2抗體 英文縮寫: phospho-CBL2 (Tyr674)

β鏈接素相互作用蛋白1抗體 英文縮寫: CTNNBIP1

磷酸化β鏈接素相互作用蛋白1抗體 英文縮寫: phospho-CTNNBIP1 (Thr43+Ser50)

磷酸化β 連環(huán)素蛋白抗體 英文縮寫: phospho-Beta catenin (Tyr86) 

葉綠體蛋白酶抗體(植物) 英文縮寫: Chloroplast protease

磷酸化后期促進(jìn)復(fù)合蛋白3抗體 英文縮寫: phospho-CDC27 (Ser427)

磷酸化絲切蛋白抗體 英文縮寫: Phospho-Cofilin (Tyr140)

磷酸化絲切蛋白抗體 英文縮寫: phospho-CFL1 (Tyr89)

磷酸化細(xì)胞周期檢測點激酶2抗體 英文縮寫: Phospho-CHK2 (ser33)

磷酸化細(xì)胞分裂周期蛋白25抗體 英文縮寫: Phospho-cdc25A (Ser178)

磷酸化細(xì)胞分裂周期蛋白25抗體 英文縮寫: Phospho-cdc25A (Ser293)

后期促進(jìn)復(fù)合蛋白3抗體 英文縮寫: CDC27

磷酸化CRK抗體 英文縮寫: phospho-CRK (Ser41)

鈣粘蛋白6抗體 英文縮寫: K Cadherin

鈣粘蛋白23抗體 英文縮寫: Cadherin like 23

羅布羅布芽生菌PCR檢測試劑盒說明書小腦變性相關(guān)蛋白2抗體 英文縮寫: CDR2

細(xì)胞分裂周期2相關(guān)蛋白激酶7抗體 英文縮寫: CRK7

A型產(chǎn)氣莢膜梭菌(魏氏梭菌) 英文縮寫: CPa(Clostridium perfringens alpha toxin)

磷酸化細(xì)胞角蛋白18抗體 英文縮寫: phospho-CK18(Ser34)

胞嘧啶脫氨酶抗體 英文縮寫: Cytosine deaminase

C2GNT3蛋白抗體 英文縮寫: C2GNT3

磷酸化原癌基因c-Jun抗體 英文縮

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