更新時(shí)間:2024-12-03
人副流感病毒通用PCR檢測(cè)試劑盒品牌是即用型PCR試劑盒的改良產(chǎn)品, 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應(yīng)緩沖液、PCR 增強(qiáng)劑、上樣染料等所有PCR 所需要的成分,用戶只需加入模板和引物即可進(jìn)行PCR 反應(yīng),具有廣泛的用途。
人副流感病毒通用PCR檢測(cè)試劑盒品牌組成及試劑配制:
1、 酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
人副流感病毒通用PCR檢測(cè)試劑盒品牌4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml。
人副流感病毒通用PCR檢測(cè)試劑盒品牌樣本采集、存放及運(yùn)輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,-70℃以下可保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(zui多凍融3次);
3、運(yùn)輸:采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1.特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
磷酸化粘著斑激酶抗體 英文縮寫: Phospho-FAK (Tyr397)
磷酸化粘著斑激酶抗體 英文縮寫: Phospho-FAK(Tyr861)
磷酸化脆性三聯(lián)體抗體 英文縮寫: Phospho-FHIT (Tyr114)
磷酸化FRA-1蛋白抗體 英文縮寫: Phospho-FRA1 (Ser265)
磷酸化Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白抗體 英文縮寫: Phospho-FADD (Ser191)
磷酸化堿性成纖維細(xì)胞生長因子受體1抗體 英文縮寫: Phospho-FLG (Tyr766)
磷酸化叉頭蛋白家族抗體 英文縮寫: Phospho-FOXO1 + FOXO3 + FOXO4 (phospho T24 + T32)
磷酸化叉頭蛋白3A抗體 英文縮寫: Phospho-FoxO3a (Ser318 + Ser321)
磷酸化叉頭蛋白3A抗體 英文縮寫: Phospho-FoxO3a (Ser294)
磷酸化叉頭蛋白3A抗體 英文縮寫: Phospho-FoxO3a (Ser253)
磷酸化叉頭蛋白家族1抗體 英文縮寫: Phospho-FoxO1 (Ser319)
磷酸化叉頭蛋白家族1抗體 英文縮寫: Phospho-FoxO1 (Ser256)
叉頭蛋白O4抗體 英文縮寫: FOXO4
磷酸化叉頭蛋白4抗體 英文縮寫: Phospho-FoxO4 (Ser193)
FMS樣激酶3 英文縮寫: FLT-3
人副流感病毒通用PCR檢測(cè)試劑盒品牌磷酸化FMS樣激酶3 英文縮寫: Phospho-FLT3(Tyr591)
磷酸化FMS樣激酶3 英文縮寫: Phospho-FLT3 (Tyr589 + Tyr591)
磷酸化FMS樣激酶3 英文縮寫: Phospho-FLT3 (Tyr842)
磷酸化FMS樣激酶3 英文縮寫: Phospho-FLT3 (Tyr969)
磷酸化c-fos抗體 英文縮寫: Phospho-c-Fos (Ser32)
磷酸化c-fos抗體 英文縮寫: Pho