更新時(shí)間:2024-12-01
禽白血病病毒(ALV)通用核酸檢測試劑盒公司相關(guān)產(chǎn)品HONE1細(xì)胞,鼻咽癌細(xì)胞 小鼠瘤細(xì)胞,EL4.IL-2細(xì)胞 CM-H030外周血白細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL葉黃素; 二羥基-d-胡蘿卜素UV>40%,BRXanthophyllNG108-15(小鼠神經(jīng)細(xì)胞瘤與大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤之融合細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2葉黃素; 二羥基-d-胡蘿卜素()HPLC>85%,XanthophyllP
訂購信息:
產(chǎn)品名稱:禽白血病病毒(ALV)通用核酸檢測試劑盒
規(guī)格:50T
編號:BH-P96745
分類:熒光PCR法
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
準(zhǔn)備物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
使用及效果:
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
檢測步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個(gè)測試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
QGY-7701細(xì)胞,肝癌細(xì)胞 羊膜細(xì)胞,HA細(xì)胞 大鼠癌細(xì)胞;SHZ-88雷帕霉素/()Rapamycin(Sirolimus)HPLC>98%,
KG-1(急性骨髓性白血病細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2甲磺酸雷沙吉蘭Rasagiline Mesylate>98.5%
Promocell C-25215 Hepatocyte Basal Medium (prf), 肝細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基,無酚紅 500ml白藜蘆醇Resveratrol>97.0%,BR
腎小管上皮細(xì)胞;HKC白藜蘆醇()ResveratrolHPLC≥99%,
ACO2 Others Human ACO2 / Aconitase 2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 瑞替加濱堿Retigabine Base含量>99.0%
FGF18 Others Human FGF18 / FGF-18 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 槐屬苷()HPLC≥98%,Sophoricoside
小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL槐屬苷HPLC≥98%,BRSophoricoside
3T3-L1小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 3T3-L1 mouse embryonic fibroblasts DMEM+10%FBS敵草索()分析 Dacthal
其他白細(xì)胞介素1-氯辛烷()分析1-Chlorooctane
小腦星形膠質(zhì)細(xì)胞( Hac) (1×106 ) 小鼠神經(jīng)干細(xì)胞(EGFP標(biāo)記) Mouse十二烷()分析,>99.7%(GC)Dodecane
禽白血病病毒(ALV)通用核酸檢測試劑盒NCI-H460 肺癌細(xì)胞SB505124>98%SB-505124
CL-0377LLC-WRC 256(大鼠腹水癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2NLG919>98%,IDO抑制劑NLG-919
mRTEC, 小鼠腎小管上皮細(xì)胞維莫德吉(GDC0449)>98%,hedgehog抑制劑Vismodegib;GDC-0449
肺轉(zhuǎn)化細(xì)胞;AE1201 肝竇內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mLZosuquidar;LY335979>98%LY-335979
主動脈平滑肌細(xì)胞RNAHASMC miRNA5 μgIso(雜質(zhì)G)美國進(jìn)口Iso Ribavirin (Ribavirin Impurity G)