更新時(shí)間:2024-11-29
單純皰疹病毒(HSV)核酸檢測試劑盒公司相關(guān)產(chǎn)品大鼠腎系膜細(xì)胞;RMC 骨肉瘤細(xì)胞,U-2 OS細(xì)胞 Walker-256細(xì)胞,大鼠肝癌細(xì)胞(癌細(xì)胞接種到肝臟成瘤)D-賴氨酸鹽酸鹽H-D-Lys-OH?HCl>99%,BRHCT116, 結(jié)直腸癌細(xì)胞 HumanD-甘露糖()D-MannoseHPLC≥98%,MSTN Others Mouse 小鼠 MSTN / GDF8 細(xì)胞裂解液 (陽性
訂購信息:
產(chǎn)品名稱:單純皰疹病毒(HSV)核酸檢測試劑盒
規(guī)格:50T
編號(hào):BH-P96910
分類:熒光PCR法
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
準(zhǔn)備物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
使用及效果:
PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
HFL1胚肺成纖維細(xì)胞 HFL1 in human embryo lung fibroblasts F12K培養(yǎng)基+10%FBS鋅試劑(≥85%(HPLC))Zincon≥85%(HPLC)
SCGB1A1 Protein Mouse 重組小鼠 Uteroglobin / SCGB1A1 蛋白 (His 標(biāo)簽)1,3-二甲基-5-吡唑酮1,3-Dimethyl-5-pyrazolone0.96
胚腎二倍體細(xì)胞;CCC-HEK-1 氣管上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL氟胺()Fluazinam分析
小鼠骨髓瘤細(xì)胞;Sp2/0-Ag14氟節(jié)胺()Flumetralin分析
CD300A Others Human CD300A 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 氯吡脲()Forchlorfenuron分析
白細(xì)胞介素-17超家族非草隆()分析Fenuron
腦血管周細(xì)胞 (HBVP) ( 5×105 ) 臍靜脈平滑肌細(xì)胞 MDA-MB-231(ATCC來源), 癌細(xì)胞丁(B9)()分析Daminozide
CM-R041大鼠肝星形細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL麗絲胺羅丹明B/酸性紅52/磺酰羅丹明B BSSulforhodamine B
IFNGR1 Others Rat 大鼠 IFNGR / IFNGR1 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 麗絲胺羅丹明B/酸性紅52/磺酰羅丹明B BS Sulforhodamine B
脊柱間充質(zhì)干細(xì)胞HVMSC氯化羅丹明110;羅丹明110>99%Rhodamine 110 chloride
單純皰疹病毒(HSV)核酸檢測試劑盒小鼠中腦縫神經(jīng)細(xì)胞(腦脊)(MN-r)(1×106) HT-29, 結(jié)腸癌細(xì)胞 HumanLGD-4033 >98%,BRLGD4033
兔主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞;SMC5-溴嘧>98%5-Bromopyrimidine
CSK Others Mouse 小鼠 CSK / C-Src kinase 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 阿HSP90 抑制劑,進(jìn)分17-DMAG
臍動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells 5 × 105方(1ml)大豆異黃酮染料木素17%-20%,異黃酮含量在40-50%Soybean isoflavones
蚊子幼蟲體細(xì)胞;Aedes albopictus clone C6/36 肺癌細(xì)胞,NCI-H1299細(xì)胞 A-431(表皮癌細(xì)胞)表戈米辛O()HPLC≥98%,Epigomisin O
檢測步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽性對(duì)照),每個(gè)測試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽性對(duì)照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。