更新時間:2024-11-28
流感病毒N亞型核酸分型檢測試劑盒公司相關(guān)產(chǎn)品TM4(正常小鼠Sertoli細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2*()3-ETHYL-3-METHYLGLUTARIMIDE含量測定Hs 746T(胃癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 COS-7L, 非洲綠猴腎成纖維細(xì)胞 腺病毒轉(zhuǎn)化的胚腎細(xì)胞;AAV-293*()Dequalinium chloride含量測定干細(xì)胞因子單克隆抗體細(xì)
訂購信息:
產(chǎn)品名稱:流感病毒N亞型核酸分型檢測試劑盒
規(guī)格:50T
編號:BH-P96332
分類:熒光PCR法
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進(jìn)行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
準(zhǔn)備物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
使用及效果:
PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
間充質(zhì)干細(xì)胞-臍帶 Human鹽酸*()Venlaine >98%,
TPST1 Others Human TPST1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸*Venlaine >98%,BR
雜交瘤(B類);IB3C10H12A12G2H8F3原卟啉IXProtoporphyrin IX>95%
BST2 Others Human TETHERIN / BST2 / CD317 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 甲磺酸*()Ropivacaine mesylateHPLC>98%,
原代上皮細(xì)胞特制無血清添加劑Many types of cells 1ml甲磺酸*Ropivacaine mesylate>98%,BR
豚鼠肺細(xì)胞;GP-F1*()HPLC>98%,Flutamide
CA14 Others Human CA14 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 環(huán)1酰胺>98%,一水合物USP,BRCyclophosphamide
CL-0443SK-N-MC(神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2環(huán)1酰胺()HPLC>99%,Cyclophosphamide
NLGN1 Others Mouse 小鼠 Neuroligin 1 / NLGN1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) >98%,ARAmidopyrine/aminopyrine
大鼠角膜內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL血管緊張素II>98.0%,BRAngiotensin II
流感病毒N亞型核酸分型檢測試劑盒HCC827(非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0385MFC-GFP(小鼠前胃癌細(xì)胞(綠色熒光蛋白標(biāo)記))5×106cells/瓶×2 非洲綠猴腎細(xì)胞;CV-12,9-二丁基-1,10-鄰二氮雜菲(>96.0%(HPLC))>96.0%(HPLC)2,9-Dibutyl-1,10-phenanthroline
胰腺癌細(xì)胞;AsPC-12,9-二苯基-1,10-菲咯啉(>98.0%(HPLC)(T))>98.0%(HPLC)(T)2,9-Diphenyl-1,10-phenanthroline
ADAM15 Others Mouse 小鼠 ADAM15 / MDC15 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 2,9-二氯-1,10-菲羅啉(>97.0%(GC)(T))>97.0%(GC)(T)2,9-Dichloro-1,10-phenanthroline
MDA-MB-453 癌細(xì)胞3,4,7,8-四甲基-1,10-菲羅啉(>98.0%(HPLC)(T))>98.0%(HPLC)(T)3,4,7,8-Tetramethyl-1,10-phenanthroline
NCI-H1650非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 NCI-H1650 cells in human non small cell lung cancer 1640+10%FBS5,5'-硫代雙水楊酸(>98.0%(GC)(T))>98.0%(GC)(T)5,5'-Thiodisalicylic Acid
檢測步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請勿選擇ROX參比熒光。