更新時間:2024-11-28
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訂購信息:
產(chǎn)品名稱:埃博拉病毒核酸檢測試劑盒
規(guī)格:50T
編號:BH-P96547
分類:熒光PCR法
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
準備物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
使用及效果:
產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
PCR反應(yīng)特點
(1) 特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復性)可以在較高的溫度下進行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。
檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設(shè)置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
TM3(小鼠間質(zhì)細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠肝癌細胞;Hepa 1-6 [Hepa1-6]洛沙坦三苯甲基Losartan Trityl Ether美國進口
心肌細胞裂解物HCMLN-三苯甲基羧酸洛沙坦N-Trityl Losartan Carboxylic Acid美國進口
XRCC5 & XRCC6 Others Human XRCC5 & XRCC6 Heterodimer 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) O-乙酰洛沙坦O-Acetyl Losartan美國進口
小鼠癌細胞;CCC-Ca761-03洛沙坦N2-葡萄糖苷酸Losartan N2-Glucuronide美國進口
NIH:OVCAR-3細胞,卵巢癌細胞 食管癌細胞,KYSR450細胞 豚鼠皮膚細胞;GP-S2洛沙坦Losartan美國進口
HPMEC Pellet 肺微血管內(nèi)皮細胞團塊 > 1 mio.cells 多聚賴氨酸 1 mg/mlPLLDL-高苯>98%,BRDL-Homophenylalanine
CL-0276H-97(高轉(zhuǎn)移肝癌細胞)5×106cells/瓶×2DL-高>98%,BRDL-Homoserine
RAB27B Others Human RAB27B 細胞裂解液 (陽性對照) 克里唑啼尼鹽酸;克里唑替尼鹽酸>99%,MET抑制劑Crizotinib HCl,PF-02341066 HCl
角膜細胞cDNAHK cDNADL->98%,BRDL-Tryptophan
豬腎細胞;PK(15) 惡性非霍奇金瘤患者的自然殺傷細胞,NK-92MI細胞 U27細胞,KM小鼠子瘤株DL->98%,可用于細胞培養(yǎng)DL-Serine
埃博拉病毒核酸檢測試劑盒髓母細胞瘤細胞;Daoy5-氟乳清酸水合物美國進口5-Fluoroorotic acid hydrate
表皮色素細胞-淺色素(HEM)( 5×105 )5-氟-1,3-二甲基美國進口5-Fluoro-1,3-dimethyluracil
絨毛間充質(zhì)成纖維細胞5-氟核苷美國進口5-Fluorouridine
胎盤絨膜癌細胞;BeWo 大鼠膀胱成纖維細胞*培養(yǎng)基 100mL5-氟二氫嘧啶-2,4-美國進口5-Fluorodihydropyrimidine-2,4-dione
N-H 小鼠骨髓瘤細胞1,3,5-三(溴)苯(>98.0%(GC))>98.0%(GC)1,3,5-Tris(bromomethyl)benzene