更新時(shí)間:2024-11-27
河弧菌(VF)核酸檢測(cè)試劑盒公司相關(guān)產(chǎn)品RA, 大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞L-L-Glutamic acid>99%,BR3T3/e細(xì)胞,小鼠成纖維細(xì)胞 白介素-2轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細(xì)胞,JEG-3/VP16-IL-2細(xì)胞 腎系膜細(xì)胞RNAHRMC miRNA5 μgL-延胡索乙素L-Tetrahydropalmatine美國(guó)進(jìn)口恒河猴肺細(xì)胞;RM-L1-d4Nicorandil-d4美國(guó)
訂購信息:
產(chǎn)品名稱:河弧菌(VF)核酸檢測(cè)試劑盒
規(guī)格:50T
編號(hào):BH-P96849
分類:熒光PCR法
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡(jiǎn)便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè);
◇高通量:多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。
準(zhǔn)備物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
使用及效果:
PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測(cè)中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
JEC, 內(nèi)膜腺癌細(xì)胞系參二醇()PanaxadiolHPLC≥98%,
mRTEC, 小鼠腎小管上皮細(xì)胞 小鼠胰腺癌beta細(xì)胞,Beta-TC-6細(xì)胞 EB (NBL-4)(牛胚氣管細(xì)胞)參三醇()PanaxatriolHPLC≥98%,
紅系白血病細(xì)胞;TF-1參皂苷CK()Compound KHPLC≥97%,
HAVCR1 Others Canine 狗 KIM-1 / TIM1 / HAVCR1 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 參皂苷F1()Ginsenoside F1HPLC≥98%,
小鼠神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞;Neuro-2a [N2a; Neuro-2a]參皂苷F2()Ginsenoside F2HPLC≥98%,
綠色熒光蛋白標(biāo)記小鼠前胃癌細(xì)胞;MFC-GFP釋放激素相關(guān)蛋白(1-13),Gn-RH Associated Peptide (GAP) (1-13), human>95%,BR
HL-7702細(xì)胞,肝細(xì)胞正常 干細(xì)胞因子單克隆抗體細(xì)胞株,AMS2細(xì)胞 敘利亞倉鼠皮膚細(xì)胞;GH-S1海沙瑞林Hexarelin>95%,BR
LM/TK(小鼠胸腺激酶缺陷細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2組胺素5Histatin 5>95%,BR
Promocell C-20011 Keratinocyte GrowthMedium 2, 角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基2型(即用型) 500ml高鈣血癥惡性因子(1-34)酰胺,Hypercalcemia Malignancy Factor (1-34), amide, human>95%,BR
角膜細(xì)胞HK高鈣血癥惡性因子(1-34), Hypercalcemia Malignancy Factor (1-34), human>95%,BR
河弧菌(VF)核酸檢測(cè)試劑盒腦膜細(xì)胞Many types of cells 5 × 105方(1ml)AdoMetS-腺甘基蛋酸100克BR,80%
CSNK2A1 Others Human CSNK2A1 / CK2A1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 連本三加醋水合物 1,2,3-Bqnzqnqtriccrboxylic ccid 269-21-7
小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞;RAW 264.7 [RAW264.7;異炳基間本; 3-異炳基本; 1-異炳基-3-基本; 1-基-3-異炳基本; 間本異炳烷; 間異炳基本烷; 間聚傘花速; M-CyMqnq;Isopropyl-M-toluqnq; 1-Mqthyl-3-isopropylbqnzqnq; 3-Isopropyltoluqnq; 1-Isopropyl-3-Mqthylbqnzqnq; Mqthyl-(3-Mqthylqthyl)bqnzqnq; M-CyMol; 232-77-3
CHO/dhFr-細(xì)胞,中國(guó)倉鼠二氫還原酶缺陷細(xì)胞 肝癌細(xì)胞,HuH-7細(xì)胞 CL-0144LoVo(大腸癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×22-Thiouracil2-硫5克3.5N,0.25×50㎜
中國(guó)倉鼠肺細(xì)胞;V792438-80-4L(-)-巖藻糖L-FUCOSE
檢測(cè)步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽性對(duì)照),每個(gè)測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽性對(duì)照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。