更新時(shí)間:2024-11-27
沙門氏菌(SPP)核酸檢測試劑盒公司相關(guān)產(chǎn)品2V6.11細(xì)胞,胚腎細(xì)胞 小鼠骨髓瘤細(xì)胞,P3X63Ag8.653細(xì)胞 CL-0405NCI-H716(結(jié)直腸腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2剛果紅(分析,≥97.0%(HPLC))分析,≥97.0%(HPLC)Congo redCNE-2Z(鼻咽癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2正癸酸(分析,≥99.5%(GC))分析,≥99.5%(GC
訂購信息:
產(chǎn)品名稱:沙門氏菌(SPP)核酸檢測試劑盒
規(guī)格:50T
編號:BH-P96851
分類:熒光PCR法
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
準(zhǔn)備物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
使用及效果:
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
檢測步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個(gè)測試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
JAR細(xì)胞,胎盤絨毛癌細(xì)胞 食管鱗癌,KYSE30細(xì)胞 中國倉鼠卵巢細(xì)胞系;pDSr a2-mpl-X甲霜靈標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=5%)Metalaxyl solution100μg/ml,u=5%
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-D3殺螟()Fenitrothion分析
TGFB1 Others Human late TGFβ1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 矮壯素() (2-Chloroethyl)trimethylammonium chloride分析
前列腺上皮細(xì)胞RNAHPEpiC miRNA5 μg蕓苔素內(nèi)酯()Brassinolide分析
大鼠間骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(RMSC-bm)(5×105)啶蟲脒()Acetamiprid分析
CNE-2Z 鼻咽癌母系細(xì)胞B美國進(jìn)口Erythromycin B
LLC-RFP-puro小鼠Lewis肺癌細(xì)胞 LLC-RFP-puro mice with Lewis lung cancer cells DMEM+10%Hyclone 滅活血清+2ug/ml puromycinA二水化合物美國進(jìn)口Erythromycin A dihydrate
TNFSF4 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 OX-40L / TNFSF4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)N-去A美國進(jìn)口N-Demethyl Erythromycin A
心室成纖維細(xì)胞 (HCFav)( 5×105 ) 293A,胚腎上皮細(xì)胞系(腺病毒包裝級別) Human琥乙美國進(jìn)口Erythromycin Ethylsuccinate
小鼠腦瘤細(xì)胞;BC3H1A1醇美國進(jìn)口Erythromycin A Enol Ether
沙門氏菌(SPP)核酸檢測試劑盒TNFSF8 Protein Rat 重組大鼠 CD153 / CD30L / TNFSF8 蛋白DL-亮酸shēng huà shì jì容量:RT1克
角膜成纖維細(xì)胞 (HcorF)( 5×105 ) EPC, 大鼠血管內(nèi)皮祖細(xì)胞 Rattus腺苷-5-單鱗醋一水合物(-20℃) cdqnosinq 5'-monophosphctq monohydrctq 184-02-4
低分化肺腺癌細(xì)胞;SK-LU-11.3-雙[(三羥)... BIS-TRIS Propane (cell culture tested,... 64431-96-5 25G 通用試劑
CANX Others Human CANX / Calnexin 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 玫瑰紅酸鈉shēng huà shì jì容量:250U
結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mLPutrescinexy7nochloride 5g/25g Sigma分裝