更新時(shí)間:2024-11-25
山羊痘病毒(GTPV)核酸檢測(cè)試劑盒公司相關(guān)產(chǎn)品AXL Others Human Axl Kinase 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 9-(2-)腺嘌呤9-(2-Hydroxyethyl)adenine美國(guó)進(jìn)口臍動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞Many types of cells 5 × 105方(1ml)E-64d,蛋白酶抑制劑,阿洛司他丁E64d,E-64d>98%,BREFNA1 Others Rat 大
訂購(gòu)信息:
產(chǎn)品名稱:山羊痘病毒(GTPV)核酸檢測(cè)試劑盒
規(guī)格:50T
編號(hào):BH-P96780
分類:熒光PCR法
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
準(zhǔn)備物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說(shuō)明書 1份
使用及效果:
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無(wú)交叉反應(yīng),無(wú)非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡(jiǎn)便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè);
◇高通量:多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。
PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過(guò)選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測(cè)中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無(wú)放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
檢測(cè)步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽(yáng)性對(duì)照),每個(gè)測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽(yáng)性對(duì)照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。
OK(負(fù)鼠腎小管細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 AMBP / Alpha 1 microglobulin 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 十一酸(Standard for GC,≥99.0%(GC))Undecanoic acidStandard for GC,≥99.0%(GC)
小鼠漿細(xì)胞瘤;MPC-11甲基壬基甲酮(Standard for GC,≥99.5%(GC))2-UndecanoneStandard for GC,≥99.5%(GC)
EPHB3 Others Human EphB3 / HEK2 (aa 585-998) 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 順式-4,7,10,13,16,19-二十二碳六1酸甲酯()cis-4,7,10,13,16,19-Docosahexaenoic acid methyl ester分析
Hela, 細(xì)胞系順式-5,8,11,14,17-二十碳五1酸()cis-5,8,11,14,17-Eicosapentaenoic acid分析
CSC, 小鼠心肌細(xì)胞 小腸頸部表皮樣癌細(xì)胞,Ca Ski細(xì)胞 F81(貓腎細(xì)胞)Celite 硅藻土 545(助濾劑,碳酸鈉處理,通量煅燒)Celite 545助濾劑,碳酸鈉處理,通量煅燒
大鼠肝細(xì)胞;IAR20膽乙基碳酸酯(>94.0%(GC))>94.0%(GC)Cholesterol Ethyl Carbonate
ACVR1 Others Mouse 小鼠 ALK-2 / ACVR1 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 膽異丙基碳酸酯(>95.0%(GC))>95.0%(GC)Cholesterol Isopropyl Carbonate
小膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基MM-prf膽丁基碳酸酯Cholesterol Butyl Carbonate
HA Others H9N2 甲型流感 H9N2 (A/Chicken/Hong Kong/G9/97) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 膽異丁基碳酸酯Cholesterol Isobutyl Carbonate
大鼠肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL單含量測(cè)定Isosorbide 5-mononitrate
山羊痘病毒(GTPV)核酸檢測(cè)試劑盒APP基因轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞株;7WD10普魯士藍(lán)shēng huà shì jì容量:RT100毫升
IGFBP3 Others Cynomolgus 食蟹猴 IGFBP3 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 茜速皇R;隊(duì)肖基本偶氮水楊醋或內(nèi)鹽 clizcrin yqllow R;clizcrin yqllow RW;clizcrin orcngq;2-xy7noxy-5-[(4-nitnophqnyl)czo]bqnzoic ccid;5-(p-nitnophqnylczo)sclicylic ccid;C.I.Mordcnt orcngq 1、C.I. 14030 43-76-7
肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞Many types of cells 5 × 105方(1ml)環(huán)孢菌速分離度用混合物;環(huán)孢速分離度用混合物 Cyclosporinq Rqsolution Mixturq 10807-42-8
MOLT-4細(xì)胞,急性T母細(xì)胞白血病細(xì)胞 大鼠卵巢癌細(xì)胞株,NUTU-19細(xì)胞 外根殼細(xì)胞cDNAHHORSC cDNA血清兔抗γ鏈shēng huà shì jì容量:500克
NCTC 1469(小鼠正常肝細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2CollagenTypeI 500mg/1g/5g/10g Sigma C9879