更新時間:2024-11-25
NCI-H295R人腎上腺皮質(zhì)細(xì)腺癌細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:人肝臟細(xì)胞裂解物HHL 人血小板因子3(PF-3)ELISA 試劑盒 Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗抗體 tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細(xì)胞(B類);Pan02-CAG-tTA-4B3 胰凝乳(含10mL酶解緩沖液) 1mLCD83 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD83 人細(xì)胞裂解液
公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷!
1、細(xì)胞傳代:
1)細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的 80%面積時,棄 25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用 PBS 清洗細(xì)胞一次;
2)添加 0.25%消化液約 1ml 至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后加入 5ml 培養(yǎng)
液終止消化,再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至 15ml 離心管中,1000rpm 離心 5min;
3)棄上清,沉淀細(xì)胞用 1-2ml 培養(yǎng)基重懸,然后按 1:2 比例進(jìn)行分瓶傳代,最后放入 37℃,5%CO2細(xì)胞
培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
2、細(xì)胞凍存:
1)細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的 80%面積時,棄 25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用 PBS 清洗細(xì)胞一次;
2)添加 0.25%消化液約 1ml 至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終
止消化,輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至 15ml 離心管中,1000rpm 離心 5min;
3)用適量的凍存液(FBS:DMSO=9 :1)重懸細(xì)胞,并放置于凍存管中;
4)先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃過夜,24h 后轉(zhuǎn)入液氮中進(jìn)行長期保存。使用程序
降溫盒可直接放入-80℃。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
NCI-H295R人腎上腺皮質(zhì)細(xì)腺癌細(xì)胞 | 1×106 | P-X886 |
一、商品介紹:
產(chǎn)品名稱 | NCI-H295R人腎上腺皮質(zhì)細(xì)腺癌細(xì)胞 |
種屬 | 人 |
細(xì)胞別稱 | NCI H295R; NCIH295R; H295R; H-295R; H295R-S1 |
年齡性別 | 48歲 |
生長特性 | 貼壁生長 |
組織來源 | 腎上腺 |
細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
背景簡介 | 該細(xì)胞系源于多能腎上腺皮質(zhì)癌細(xì)胞系NCI-H295,后者由Gazdar AF等建立,從腎上腺皮質(zhì)的腫瘤中分離而來。NCI-H295細(xì)胞經(jīng)改變培養(yǎng)條件獲得了NCI-295R細(xì)胞,群體倍增時間從原來的5天減為2天。NCI-295細(xì)胞懸浮生長,而NCI-H295R呈單層貼壁生長。NCI-H295R細(xì)胞保留了產(chǎn)生雄激素的能力,對血管緊張素Ⅱ和鉀離子有反應(yīng)。 |
生物安全等級 | 1 |
細(xì)胞規(guī)格 | 1×106 |
支原體檢測 | 無 |
基因表達(dá)情況 | aldosterone; cortisol; C19 steroids |
保藏機(jī)構(gòu) | ATCC; CRL-2128 |
培養(yǎng)基 | DMEM/F12+ITS-G+10% FBS+PS |
培養(yǎng)條件 | 氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃ |
凍存條件 | 無血清凍存液,液氮儲存 |
倍增時間 |
二、細(xì)胞培養(yǎng)操作
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10 cm皿中,加入約8 mL培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,使消化液浸潤所有細(xì)胞,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min(視細(xì)胞情況而定),然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中,1000 rpm離心5 min,棄去上清液,補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。
c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 3) 細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例;a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液,使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識。將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產(chǎn)品:
nNos/: 合成酶-1抗體 蚊子幼蟲體細(xì)胞;Aedes albopictus clone C6/36
IL27 Protein Mouse 重組小鼠 IL27 / Ierleukin-27 蛋白 (His 標(biāo)簽) 大鼠神經(jīng)型NO合酶(nNOS)ELISA試劑盒 TNF- Beta(Mouse Tumor necrosis factor Beta) 小鼠壞死因子β 96T
eNOS: 合成酶-3(內(nèi)皮型)抗體 KEAP1 Others Human 人 KEAP1 / INRF2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
小鼠前列腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 大鼠神經(jīng)纖維網(wǎng)蛋白1(P1)ELISA試劑盒 OX-B(Human Orexin B) 人食欲素/阿立新B 96T
Nociceptin receptor: 孤肽受體/痛敏肽受體抗體 B95-8細(xì)胞,EBV 轉(zhuǎn)化的絨猴白細(xì)胞 人大腸癌細(xì)胞,CL187/CCL187細(xì)胞 CM-H125人腦成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基100mL
IGF1R: 1受體抗體 CDC37 Others Mouse 小鼠 CDC37 / CDC37A 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人尿道上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 人H鈣粘連蛋白(HCDH13)ELISA試劑盒 Rarres2/TIG2/Chemerin(Retinoic acid receptor responder protein 2) 受體應(yīng)答蛋白2抗原 0.5mg
IGFBP2: 結(jié)合蛋白2抗體 高背鯽魚尾鰭細(xì)胞;GBJd 人正常皮膚細(xì)胞,TE 353.Sk細(xì)胞 HO-8910(卵巢癌細(xì)胞)
CD3D Others Mouse 小鼠 CD3d / CD3 delta 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 人H-ras ELISA 試劑盒 TLR3 (Toll-like receptor 3) Toll樣受體3抗原 0.5mg
IGFBP5: 結(jié)合蛋白5抗體 山羊腎上皮樣細(xì)胞;DG-K1
NCI-H295R人腎上腺皮質(zhì)細(xì)腺癌細(xì)胞CL-0142LM/TK(小鼠胸腺激酶缺陷細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 大鼠白介素2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ)ELISA試劑盒 IDUA(Human Alpha-L-iduronidase) 人αL艾杜糖苷酸酶 96T
Retinoic acid induced 17: 維誘導(dǎo)蛋白17抗體 EPHB4 Others Human 人 EphB4 / HTK 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人腎皮質(zhì)上皮細(xì)胞裂解物HRCEpiCL 大鼠白介素2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ)ELISA 試劑盒 Alpha2-AP(Human Alpha2-Antiplasmin) 人α2抗纖溶酶 96T
RanGAP1: RAN GTPase酶激活蛋白1抗體 恒河猴腎細(xì)胞;RM-3
SV40轉(zhuǎn)染人成骨細(xì)胞;hFOB 1.19 人心房肌細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 大鼠白介素2可溶性受體α鏈(sIL-2Rα/CD25)ELISA試劑盒 NAG(Human N-acetyl- Beta-D-glucosaminidase) 人N-乙酰-β-D-基葡萄糖苷酶 96T
三、培養(yǎng)注意事項(xiàng)
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。
3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。
4. 貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞,再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?,個別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞 的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。
8. 備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請換用按照說明書細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。 收到細(xì)胞后第一次傳代建議 1:2 傳代 。
9. 注意: 1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。