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RPMI6666細(xì)胞

更新時間:2024-11-25

簡要描述:

RPMI6666細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:人體體液正鐵白蛋白(methemalbumin)含量比色法定量檢測試劑盒
動物血液正鐵白蛋白(methemalbumin)含量比色法定量檢測試劑盒
醫(yī)學(xué)生化經(jīng)典分析試劑專題
細(xì)胞葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G6PD)活性酶動力比色法
組織葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G6PD)活性酶動力比色法

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公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷!


一、商品介紹:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

RPMI6666細(xì)胞

1×106

P-X9447

 

1、細(xì)胞傳代:

1)細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的 80%面積時,棄 25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用 PBS 清洗細(xì)胞一次;

2)添加 0.25%消化液約 1ml 至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后加入 5ml 培養(yǎng)

液終止消化,再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至 15ml 離心管中,1000rpm 離心 5min;

3)棄上清,沉淀細(xì)胞用 1-2ml 培養(yǎng)基重懸,然后按 1:2 比例進(jìn)行分瓶傳代,最后放入 37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

2、細(xì)胞凍存:

1)細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的 80%面積時,棄 25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用 PBS 清洗細(xì)胞一次;

2)添加 0.25%消化液約 1ml 至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終

止消化,輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至 15ml 離心管中,1000rpm 離心 5min;

3)用適量的凍存液(FBS:DMSO=9 :1)重懸細(xì)胞,并放置于凍存管中;

4)先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃過夜,24h 后轉(zhuǎn)入液氮中進(jìn)行長期保存。使用程序降溫盒可直接放入-80℃。

二、細(xì)胞培養(yǎng)操作

1) 復(fù)蘇細(xì)胞:以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10 cm皿中,加入約8 mL培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,使消化液浸潤所有細(xì)胞,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min(視細(xì)胞情況而定),然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中,1000 rpm離心5 min,棄去上清液,補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。

c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 3) 細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例;a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。

b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液,使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識。將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。


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三、培養(yǎng)注意事項(xiàng) 

1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。

3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。

4. 貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞,再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?,個別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞 的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細(xì)胞僅供科研使用。

8. 備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請換用按照說明書細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。     收到細(xì)胞后第一次傳代建議 1:2 傳代 。

9. 注意:  1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。

公司正在出售的產(chǎn)品:

Rat pyridinoline crosslinks (PY) ELISA Kit 大鼠交聯(lián)物(PY)ELISA試劑盒

大鼠沉默調(diào)節(jié)蛋白3(SI3)ELISA試劑盒 ,英文名: SI3 ELISA Kit

RatapoproteinB100,apo-B100ELISAKit 大鼠載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforCrELISAKit大鼠骨膠原交聯(lián)規(guī)格:48T/96T

細(xì)胞氧化型(GSSG)濃度高效液相色譜定量檢測試劑盒50

人前膠原C端肽酶()ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

小鼠血管活性腸肽(VIP)免疫試劑盒 Mouse Vasoactive Iestinal Peptide,VIP ELISA Kit

3型脊髓灰質(zhì)炎病毒(PV-3)檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

Humaheumatoidahritisassociatednuclearaigen,RANAELISA試劑盒人抗類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎核抗原(RANA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

ELISAKitCH50小鼠血清總補(bǔ)體規(guī)格:48T/96T

ELISAKitCF人睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子規(guī)格:48T/96T

大鼠血小板膜糖蛋白Ⅱba(GP-ba/CD41+CD61)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人纖維母細(xì)胞生長因子受體1癌基因伴侶(FGFR1OP)免疫試劑盒 Human FGFR1 oncogene paner,FGFR1OP ELISA kit

蛋白質(zhì)羰基測試盒 紫外分光光度法 50/24

Ratmyeloperoxidase,MPOELISA試劑盒大鼠(MPO)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

腫瘤壞死因子受體超家族成員EDAR抗體

骨折骨痂蛋白1抗體

溶質(zhì)載體轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白家族35成員F1抗體

MS4A12蛋白抗體

線粒體DNA拓普西異構(gòu)酶Ⅰ抗體

白細(xì)胞介素-18/干擾素γ誘導(dǎo)因子抗體

磷酸化p21激活激酶1/2抗體

RPMI6666細(xì)胞CD7重組兔單克隆抗體

血小板糖蛋白GPIbCD42b)重組兔單克隆抗體


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