更新時(shí)間:2024-11-23
AH109 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50菌株一種常用于質(zhì)??寺〉木辍F洇?0lacZΔM15基因的產(chǎn)物可與pUC載體編碼的b-半乳糖苷酶氨基端實(shí)現(xiàn)a互補(bǔ),可用于藍(lán)白斑篩選。recA1和endA1 的突變有利于克隆DNA 的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒DNA的提取。
AH109 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50以下是的訂購(gòu)信息儲(chǔ)存條件:-70℃凍存
操作方法:
1. 取-80℃保存的農(nóng)桿菌感受態(tài)于室溫或手心片刻待其部分融化,處于冰水混合狀態(tài)時(shí)插入冰中。
2.每100 μl感受態(tài)加入0.01-1 μg質(zhì)粒DNA(轉(zhuǎn)化效率較高,*次使用前做預(yù)實(shí)驗(yàn)確定所加質(zhì)粒的量),用手管底混勻,依次于冰上靜置5分鐘、液氮5分鐘、37℃水浴5分鐘、冰浴5分鐘。
AH109 感受態(tài)細(xì)胞100ul*503. 加入700 μl無(wú)抗生素的LB或YEB液體培養(yǎng)基,于28℃振蕩培養(yǎng)2~3小時(shí)。
4. 6000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊涂布于含相應(yīng)抗生素的LB或YEB平板上,倒置放于28℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)2-3天
注意事項(xiàng)
1. 加入質(zhì)粒時(shí)體積不應(yīng)大于感受態(tài)體積的1/10;質(zhì)粒不純或存在乙醇等有機(jī)物污染,轉(zhuǎn)化效率急劇下降;質(zhì)粒增大一倍,轉(zhuǎn)化效率下降一個(gè)數(shù)量級(jí)。
AH109 感受態(tài)細(xì)胞100ul*502. 混入質(zhì)粒時(shí)應(yīng)輕柔操作。轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)粒可相應(yīng)減少終用于涂板的菌量。
3. 平板上陽(yáng)性克隆密度過(guò)大時(shí),由于營(yíng)養(yǎng)不足,陽(yáng)性克隆生長(zhǎng)變慢,菌落變小,為了獲得大的菌落,應(yīng)減少質(zhì)粒用量。
4. 濃度不應(yīng)高于25 μg/ml,過(guò)高的濃度不利于農(nóng)桿菌生長(zhǎng),會(huì)降低其生長(zhǎng)速度和轉(zhuǎn)化效率。本公司感受態(tài)計(jì)算轉(zhuǎn)化效率時(shí)所用平板只含有50 μg/ml kan,若所用平板含有20 μg/ml rif則轉(zhuǎn)化效率降低到1/2。
5. 培養(yǎng)基中加入的目的是防止雜菌生長(zhǎng)、篩選農(nóng)桿菌;根據(jù)所用菌株抗性加入Ti質(zhì)粒篩選抗生素可防止Ti質(zhì)粒丟失,但Ti質(zhì)粒篩選抗生素不利于農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)基因操作,所以一般培養(yǎng)農(nóng)桿菌時(shí)不考慮這些抗生素,Ti質(zhì)粒丟失的概率極低(可以忽略)。
AFP 人甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白 規(guī)格: 48T/96T
fMet 人甲酰 規(guī)格: 48T/96T
PGD2-MOX 人甲肟前列腺素D2 規(guī)格: 48T/96T
Methylase 人甲基化酶 規(guī)格: 48T/96T
MTX 人喋呤 規(guī)格: 48T/96T
PV-IgG 人脊髓灰質(zhì)炎病毒IgG 規(guī)格: 48T/96T
CSF 人集落刺激因子 規(guī)格: 48T/96T
VLDLR 人極低密度脂蛋白受體 規(guī)格: 48T/96T
KLK 8 人8 規(guī)格: 48T/96T
KLK 6 人6 規(guī)格: 48T/96T
KLK 11 人11 規(guī)格: 48T/96T
KLK 10 人10 規(guī)格: 48T/96T
KLK 1 人1 規(guī)格: 48T/96T
CKMB 人激動(dòng)異構(gòu)酶/細(xì)胞分裂素MB 規(guī)格: 48T/96T
SDF-1β/CXCL12 人基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1β 規(guī)格: 48T/96T
SDF-1a/CXCL12 人基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1a 規(guī)格: 48T/96T
ST3 人基質(zhì)裂解素 規(guī)格: 48T/96T
ST2 人基質(zhì)裂解素 規(guī)格: 48T/96T
ST1 人基質(zhì)裂解素 規(guī)格: 48T/96T
MAT 人基質(zhì)裂解蛋白 規(guī)格: 48T/96T
TIMP-1 人基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制因子1 規(guī)格: 48T/96T
TIMP-4 人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子4 規(guī)格: 48T/96T
TIMP-3 人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子3 規(guī)格: 48T/96T
TIMP-2 人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子2 規(guī)格: 48T/96T
TIMP-1 人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1 規(guī)格: 48T/96T
MMP-9/Gelatinase B 人基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B 規(guī)格: 48T/96T
MMP-8 人基質(zhì)金屬蛋白酶8/中性粒細(xì)胞膠原酶 規(guī)格: 48T/96T
MMP-7 人基質(zhì)金屬蛋白酶7 規(guī)格: 48T/96T
MMP-5 人基質(zhì)金屬蛋白酶5 規(guī)格: 48T/96T
MMP-4 人基質(zhì)金屬蛋白酶4 規(guī)格: 48T/96T
MMP-3 人基質(zhì)金屬蛋白酶3 規(guī)格: 48T/96T
MMP-2 人基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A 規(guī)格: 48T/96T
MMP-13 人基質(zhì)金屬蛋白酶13 規(guī)格: 48T/96T
AH109 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50 MMP11 人基質(zhì)金屬蛋白酶11 規(guī)格: 48T/96T
MMP-10 人基質(zhì)金屬蛋白酶10 規(guī)格: 48T/96T
MMP-1 人基質(zhì)金屬蛋白酶1 規(guī)格: 48T/96T