更新時(shí)間:2024-11-23
C58C1 電感受態(tài)細(xì)胞50ul*50是采用大腸桿菌經(jīng)特殊工藝處理得到的感受態(tài)細(xì)胞,可用于DNA 的化學(xué)轉(zhuǎn)化。使用pUC19 質(zhì)粒檢測(cè),轉(zhuǎn)化效率可達(dá)108個(gè)轉(zhuǎn)化子/μg質(zhì)粒DNA,-70℃保存3個(gè)月轉(zhuǎn)化效率可保持在90%以上。
C58C1 電感受態(tài)細(xì)胞50ul*50以下是的訂購(gòu)信息儲(chǔ)存條件:-70℃凍存
操作方法:
1. 取-80℃保存的農(nóng)桿菌感受態(tài)于室溫或手心片刻待其部分融化,處于冰水混合狀態(tài)時(shí)插入冰中。
2.每100 μl感受態(tài)加入0.01-1 μg質(zhì)粒DNA(轉(zhuǎn)化效率較高,*次使用前做預(yù)實(shí)驗(yàn)確定所加質(zhì)粒的量),用手管底混勻,依次于冰上靜置5分鐘、液氮5分鐘、37℃水浴5分鐘、冰浴5分鐘。
3. 加入700 μl無(wú)抗生素的LB或YEB液體培養(yǎng)基,于28℃振蕩培養(yǎng)2~3小時(shí)。
C58C1 電感受態(tài)細(xì)胞50ul*504. 6000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊涂布于含相應(yīng)抗生素的LB或YEB平板上,倒置放于28℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)2-3天
注意事項(xiàng)
1. 加入質(zhì)粒時(shí)體積不應(yīng)大于感受態(tài)體積的1/10;質(zhì)粒不純或存在乙醇等有機(jī)物污染,轉(zhuǎn)化效率急劇下降;質(zhì)粒增大一倍,轉(zhuǎn)化效率下降一個(gè)數(shù)量級(jí)。
2. 混入質(zhì)粒時(shí)應(yīng)輕柔操作。轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)粒可相應(yīng)減少終用于涂板的菌量。
C58C1 電感受態(tài)細(xì)胞50ul*503. 平板上陽(yáng)性克隆密度過大時(shí),由于營(yíng)養(yǎng)不足,陽(yáng)性克隆生長(zhǎng)變慢,菌落變小,為了獲得大的菌落,應(yīng)減少質(zhì)粒用量。
4. 濃度不應(yīng)高于25 μg/ml,過高的濃度不利于農(nóng)桿菌生長(zhǎng),會(huì)降低其生長(zhǎng)速度和轉(zhuǎn)化效率。本公司感受態(tài)計(jì)算轉(zhuǎn)化效率時(shí)所用平板只含有50 μg/ml kan,若所用平板含有20 μg/ml rif則轉(zhuǎn)化效率降低到1/2。
5. 培養(yǎng)基中加入的目的是防止雜菌生長(zhǎng)、篩選農(nóng)桿菌;根據(jù)所用菌株抗性加入Ti質(zhì)粒篩選抗生素可防止Ti質(zhì)粒丟失,但Ti質(zhì)粒篩選抗生素不利于農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)基因操作,所以一般培養(yǎng)農(nóng)桿菌時(shí)不考慮這些抗生素,Ti質(zhì)粒丟失的概率極低(可以忽略)。
IL-1sRⅡ 人白介素1可溶性受體Ⅱ 規(guī)格: 48T/96T
IL-1sRⅠ 人白介素1可溶性受體Ⅰ 規(guī)格: 48T/96T
ICE 人白介素1β轉(zhuǎn)換酶 規(guī)格: 48T/96T
IL-1β 人白介素1β 規(guī)格: 48T/96T
IL-1α 人白介素1α 規(guī)格: 48T/96T
IL-18 人白介素18 規(guī)格: 48T/96T
IL-17 人白介素17 規(guī)格: 48T/96T
IL-16 人白介素16 規(guī)格: 48T/96T
IL-15 人白介素15 規(guī)格: 48T/96T
IL-13 人白介素13 規(guī)格: 48T/96T
IL-12/P70 人白介素12 規(guī)格: 48T/96T
IL-12/P40 人白介素12 規(guī)格: 48T/96T
IL-11 人白介素11 規(guī)格: 48T/96T
IL-10 人白介素10 規(guī)格: 48T/96T
IL-1 人白介素1 規(guī)格: 48T/96T
TR 人靶向核糖核酸酶 規(guī)格: 48T/96T
OTF2B 人八聚體轉(zhuǎn)錄因子 規(guī)格: 48T/96T
OTF2A 人八聚體轉(zhuǎn)錄因子 規(guī)格: 48T/96T
ECHO IgM 人艾柯病毒IgM 規(guī)格: 48T/96T
CEF 人癌胚鐵蛋白 規(guī)格: 48T/96T
CEA/CD66 人癌胚抗原 規(guī)格: 48T/96T
人癌基因蛋白質(zhì)p190/bcr-abl ELISA Kit,48T/96T 人癌基因蛋白質(zhì)p190/bcr-abl ELISA Kit,48T/96T 規(guī)格: 48T/96T
Orexin A 人阿立新A 規(guī)格: 48T/96T
AGPs 人阿拉伯半乳糖蛋白 規(guī)格: 48T/96T
POMC 人阿黑皮素原 規(guī)格: 48T/96T
POMC 人阿黑皮素原 規(guī)格: 48T/96T
AO 人吖啶橙 規(guī)格: 48T/96T
IFN-ω 人ω干擾素 規(guī)格: 48T/96T
Pγ 人γ肽 規(guī)格: 48T/96T
GGT 人γ谷氨酰轉(zhuǎn)移酶 規(guī)格: 48T/96T
γ-ECS 人γ谷氨酰半合成酶 規(guī)格: 48T/96T
IFI16/p16 人γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16 規(guī)格: 48T/96T
C58C1 電感受態(tài)細(xì)胞50ul*50GABA 人γ氨基丁酸 規(guī)格: 48T/96T
IFN-γ 人γ 干擾素 規(guī)格: 48T/96T
β-TG 人β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白 規(guī)格: 48T/96T
BTC 人β細(xì)胞素 規(guī)格: 48T/96T
人β乳糖蛋白抗體IgG ELISA Kit,48T/96T 人β乳糖蛋白抗體IgG