更新時(shí)間:2024-11-23
Ar 1193 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50是采用大腸桿菌經(jīng)特殊工藝處理得到的感受態(tài)細(xì)胞,可用于DNA 的化學(xué)轉(zhuǎn)化。使用pUC19 質(zhì)粒檢測(cè),轉(zhuǎn)化效率可達(dá)108個(gè)轉(zhuǎn)化子/μg質(zhì)粒DNA,-70℃保存3個(gè)月轉(zhuǎn)化效率可保持在90%以上。
Ar 1193 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50以下是的訂購(gòu)信息儲(chǔ)存條件:-70℃凍存
操作方法:
1. 取-80℃保存的農(nóng)桿菌感受態(tài)于室溫或手心片刻待其部分融化,處于冰水混合狀態(tài)時(shí)插入冰中。
2.每100 μl感受態(tài)加入0.01-1 μg質(zhì)粒DNA(轉(zhuǎn)化效率較高,*次使用前做預(yù)實(shí)驗(yàn)確定所加質(zhì)粒的量),用手管底混勻,依次于冰上靜置5分鐘、液氮5分鐘、37℃水浴5分鐘、冰浴5分鐘。
3. 加入700 μl無抗生素的LB或YEB液體培養(yǎng)基,于28℃振蕩培養(yǎng)2~3小時(shí)。
Ar 1193 感受態(tài)細(xì)胞100ul*504. 6000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊涂布于含相應(yīng)抗生素的LB或YEB平板上,倒置放于28℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)2-3天
注意事項(xiàng)
1. 加入質(zhì)粒時(shí)體積不應(yīng)大于感受態(tài)體積的1/10;質(zhì)粒不純或存在乙醇等有機(jī)物污染,轉(zhuǎn)化效率急劇下降;質(zhì)粒增大一倍,轉(zhuǎn)化效率下降一個(gè)數(shù)量級(jí)。
2. 混入質(zhì)粒時(shí)應(yīng)輕柔操作。轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)??上鄳?yīng)減少終用于涂板的菌量。
Ar 1193 感受態(tài)細(xì)胞100ul*503. 平板上陽性克隆密度過大時(shí),由于營(yíng)養(yǎng)不足,陽性克隆生長(zhǎng)變慢,菌落變小,為了獲得大的菌落,應(yīng)減少質(zhì)粒用量。
4. 濃度不應(yīng)高于25 μg/ml,過高的濃度不利于農(nóng)桿菌生長(zhǎng),會(huì)降低其生長(zhǎng)速度和轉(zhuǎn)化效率。本公司感受態(tài)計(jì)算轉(zhuǎn)化效率時(shí)所用平板只含有50 μg/ml kan,若所用平板含有20 μg/ml rif則轉(zhuǎn)化效率降低到1/2。
5. 培養(yǎng)基中加入的目的是防止雜菌生長(zhǎng)、篩選農(nóng)桿菌;根據(jù)所用菌株抗性加入Ti質(zhì)粒篩選抗生素可防止Ti質(zhì)粒丟失,但Ti質(zhì)粒篩選抗生素不利于農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)基因操作,所以一般培養(yǎng)農(nóng)桿菌時(shí)不考慮這些抗生素,Ti質(zhì)粒丟失的概率極低(可以忽略)。
IgE 馬免疫球蛋白E 規(guī)格: 48T/96T
β-EP 馬β內(nèi)啡肽 規(guī)格: 48T/96T
Aβ1-40 馬β淀粉樣蛋白1-40 規(guī)格: 48T/96T
TGFβ2 駱駝轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2 規(guī)格: 48T/96T
Lp-PL-A2 駱駝脂蛋白磷脂酶A2 規(guī)格: 48T/96T
ET-1 駱駝內(nèi)皮素1 規(guī)格: 48T/96T
β-EP 駱駝β內(nèi)啡肽 規(guī)格: 48T/96T
CC16 裸鼠克拉拉細(xì)胞蛋白 規(guī)格: 48T/96T
AFP 裸鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白 規(guī)格: 48T/96T
COX-2 裸鼠環(huán)加氧酶2 規(guī)格: 48T/96T
PP 裸鼠蛋白磷酸酶 規(guī)格: 48T/96T
MrNV 羅氏沼蝦諾達(dá)病毒 規(guī)格: 48T/96T
MHC 鹿主要組織相容性復(fù)合體 規(guī)格: 48T/96T
IGFBP-3 鹿胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3 規(guī)格: 48T/96T
SAA 鹿血清淀粉樣蛋白A 規(guī)格: 48T/96T
eNOS 鹿內(nèi)皮型一氧化氮合成酶 規(guī)格: 48T/96T
EMP 鹿紅細(xì)胞膜蛋白 規(guī)格: 48T/96T
VTG 鯉魚卵黃蛋白原 規(guī)格: 48T/96T
VTG 鯉魚卵黃蛋白原 規(guī)格: 48T/96T
UEA 荊豆凝集素 規(guī)格: 48T/96T
LT 家蠶卵黃蛋白 規(guī)格: 48T/96T
TGF-β1 雞轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1 規(guī)格: 48T/96T
MHC/B 雞主要組織相容性復(fù)合體 規(guī)格: 48T/96T
TRAIL-R3 雞腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3 規(guī)格: 48T/96T
TNF-α 雞腫瘤壞死因子α 規(guī)格: 48T/96T
LPS 雞脂多糖/內(nèi)毒素 規(guī)格: 48T/96T
ACAC 雞乙酰乙酸檢測(cè) 規(guī)格: 48T/96T
IGF-1 雞胰島素樣生長(zhǎng)因子1 規(guī)格: 48T/96T
NADPH 雞腺嘌呤二核苷酸磷酸 規(guī)格: 48T/96T
PF-4/CXCL4 雞血小板因子4 規(guī)格: 48T/96T
NO 雞血清一氧化氮 規(guī)格: 48T/96T
VEGF 雞血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子 規(guī)格: 48T/96T
HA 雞透明質(zhì)酸 規(guī)格: 48T/96T
CA 雞碳酸酐酶 規(guī)格: 48T/96T
GH 雞生長(zhǎng)因子 規(guī)格: 48T/96T
ADM 雞腎上腺髓質(zhì)素 規(guī)格: 48T/96T
Ar 1193 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50 GFAP 雞神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白 規(guī)格: 48T/96T
HSP-70 雞熱休克蛋白70 規(guī)格: 48T/96T
HSP-70 雞熱休克蛋白70 規(guī)格: 48T/96T
Hsp-60 雞熱休克蛋白60 規(guī)格: 48T/96T