更新時間:2024-11-23
Cry1A(c)基因核酸檢測試劑盒公司相關(guān)產(chǎn)品P19細(xì)胞,畸胎癌細(xì)胞 感染HCV肝癌細(xì)胞,HuH7-HCV細(xì)胞 CL-0224SW579(甲狀腺鱗癌細(xì)胞 )5×106cells/瓶×24,4'-二氨基二苯甲酮(>98.0%(T))4,4'-Diaminobenzophenone>98.0%(T)中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-E14,4'-二氯二苯甲酮(>99.0%(GC))4,4
訂購信息:
產(chǎn)品名稱:Cry1A(c)基因核酸檢測試劑盒
規(guī)格:48T 0.1PCR管
編號:BH-P97077
分類:PCR-熒光探針法
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
準(zhǔn)備物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
使用及效果:
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進(jìn)行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
檢測步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
CL-0377LLC-WRC 256(大鼠腹水癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2皮質(zhì)甾酮()CorticosteroneHPLC>97.0%,
mRTEC, 小鼠腎小管上皮細(xì)胞二硫化四乙基秋蘭姆Disulfiram>97%
肺轉(zhuǎn)化細(xì)胞;AE1201 肝竇內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL雙硫侖()DisulfiramHPLC>99%,
主動脈平滑肌細(xì)胞RNAHASMC miRNA5 μg楊梅素/楊梅酮MyricetinHPLC>95.0%,BR
PTPRA Others Human PTPRA / PTPalpha (aa 174-793) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 楊梅素/楊梅酮()MyricetinHPLC>98.0%,
MCF-7/ER36細(xì)胞,癌細(xì)胞 小鼠胰島素瘤β細(xì)胞(NOD/Lt轉(zhuǎn)基因小鼠,SV40巨T抗原),NIT-1細(xì)胞 MDA-MB-231(ATCC來源), 癌細(xì)胞敵草腈()分析Dichlobenil
MKN-28(胃癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2乙二醇苯()分析,≥99.5%(GC)Ethylene glycol monophenyl ether
HUVEC Growth Medium 2pooled Pellet #N/A > 1 mio.cells 前脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基PAM乙二醇苯(standard for GC,≥99.5%(GC))standard for GC,≥99.5%(GC)Ethylene glycol monophenyl ether
CL-0399NCI-H295R(腎上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2O-芐基-L-芐酯鹽酸鹽0.985O-Benzyl-L-tyrosine benzyl ester
EPHA7 Others Rat 大鼠 EphA7 / EHK3 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) O-芐基-L-甲酯鹽酸鹽0.985O-Benzyl-L-tyrosine methyl ester
Cry1A(c)基因核酸檢測試劑盒IMR-32(神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×21,1'-二萘胺(>98.0%(HPLC)(N))>98.0%(HPLC)(N)1,1'-Dinaphthylamine
Promocell C-21060 Airway Epithelial Cell GrowthMedium, 呼吸道上皮細(xì)胞生長培養(yǎng)基(即用型) 500ml2,2'-二萘胺(>98.0%(GC))>98.0%(GC)2,2'-Dinaphthylamine
星形膠質(zhì)細(xì)胞裂解物HAL1,2'-二萘胺(升華精制品)(>98.0%(HPLC)(N))>98.0%(HPLC)(N)1,2'-Dinaphthylamine (purified by sublimation)
HBEGF Others Human HBEGF / D 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) N,N',N''-三苯基-1,3,5-苯三胺(>98.0%(HPLC)(T))>98.0%(HPLC)(T)N,N',N''-Triphenyl-1,3,5-benzenetriamine
結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;SW620 [SW 620;SW-620]3-吲哚乙酸(IAA)>98%,BR3-Indoleacetic acid