更新時間:2024-11-23
Rosetta-gami B(DE3) 感受態(tài)細胞100ul*10是采用大腸桿菌經(jīng)特殊工藝處理得到的感受態(tài)細胞,可用于DNA 的化學轉(zhuǎn)化。使用pUC19 質(zhì)粒檢測,轉(zhuǎn)化效率可達108個轉(zhuǎn)化子/μg質(zhì)粒DNA,-70℃保存3個月轉(zhuǎn)化效率可保持在90%以上。
Rosetta-gami B(DE3) 感受態(tài)細胞100ul*10以下是的訂購信息儲存條件:-70℃凍存
操作方法:
1. 取-80℃保存的農(nóng)桿菌感受態(tài)于室溫或手心片刻待其部分融化,處于冰水混合狀態(tài)時插入冰中。
2.每100 μl感受態(tài)加入0.01-1 μg質(zhì)粒DNA(轉(zhuǎn)化效率較高,*次使用前做預實驗確定所加質(zhì)粒的量),用手管底混勻,依次于冰上靜置5分鐘、液氮5分鐘、37℃水浴5分鐘、冰浴5分鐘。
Rosetta-gami B(DE3) 感受態(tài)細胞100ul*103. 加入700 μl無抗生素的LB或YEB液體培養(yǎng)基,于28℃振蕩培養(yǎng)2~3小時。
4. 6000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊涂布于含相應抗生素的LB或YEB平板上,倒置放于28℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)2-3天
注意事項
1. 加入質(zhì)粒時體積不應大于感受態(tài)體積的1/10;質(zhì)粒不純或存在乙醇等有機物污染,轉(zhuǎn)化效率急劇下降;質(zhì)粒增大一倍,轉(zhuǎn)化效率下降一個數(shù)量級。
Rosetta-gami B(DE3) 感受態(tài)細胞100ul*102. 混入質(zhì)粒時應輕柔操作。轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)??上鄳獪p少終用于涂板的菌量。
3. 平板上陽性克隆密度過大時,由于營養(yǎng)不足,陽性克隆生長變慢,菌落變小,為了獲得大的菌落,應減少質(zhì)粒用量。
4. 濃度不應高于25 μg/ml,過高的濃度不利于農(nóng)桿菌生長,會降低其生長速度和轉(zhuǎn)化效率。本公司感受態(tài)計算轉(zhuǎn)化效率時所用平板只含有50 μg/ml kan,若所用平板含有20 μg/ml rif則轉(zhuǎn)化效率降低到1/2。
5. 培養(yǎng)基中加入的目的是防止雜菌生長、篩選農(nóng)桿菌;根據(jù)所用菌株抗性加入Ti質(zhì)粒篩選抗生素可防止Ti質(zhì)粒丟失,但Ti質(zhì)粒篩選抗生素不利于農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)基因操作,所以一般培養(yǎng)農(nóng)桿菌時不考慮這些抗生素,Ti質(zhì)粒丟失的概率極低(可以忽略)。
matrix metalloproteinase 5,MMP-5 ELISA Kit 購買我公司ELISA試劑盒保證質(zhì)量,靈敏性高、特異性強、重復性好等優(yōu)點已經(jīng)得到廣大客戶的認可,您可放心,且我司有專門的售后部門對您進行全線跟蹤。 :規(guī)格; 96T/48T 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶5(MMP-5)ELISA試劑盒廠家 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶5(MMP-5)ELISA試劑盒報價
小鼠端粒酶(TE)ELISA試劑盒 :英文名稱; telomerase,TE ELISA Kit 購買我公司ELISA試劑盒保證質(zhì)量,靈敏性高、特異性強、重復性好等優(yōu)點已經(jīng)得到廣大客戶的認可,您可放心,且我司有專門的售后部門對您進行全線跟蹤。 :規(guī)格; 96T/48T 小鼠端粒酶(TE)ELISA試劑盒廠家 小鼠端粒酶(TE)ELISA試劑盒報價
小鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒 :英文名稱; intestinal fatty acid binding protein,iFABP ELISA Kit 購買我公司ELISA試劑盒保證質(zhì)量,靈敏性高、特異性強、重復性好等優(yōu)點已經(jīng)得到廣大客戶的認可,您可放心,且我司有專門的售后部門對您進行全線跟蹤。 :規(guī)格; 96T/48T 小鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒廠家 小鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒報價
小鼠表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒 :英文名稱; Epidermal growth factor,EGF ELISA Kit 購買我公司ELISA試劑盒保證質(zhì)量,靈敏性高、特異性強、重復性好等優(yōu)點已經(jīng)得到廣大客戶的認可,您可放心,且我司有專門的售后部門對您進行全線跟蹤。 :規(guī)格; 96T/48T 小鼠表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒廠家 小鼠表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒報價
小鼠白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA試劑盒 :英文名稱; leukemia inhibitory factor receptor,LIFR ELISA Kit 購買我公司ELISA試劑盒保證質(zhì)量,靈敏性高、特異性強、重復性好等優(yōu)點已經(jīng)得到廣大客戶的認可,您可放心,且我司有專門的售后部門對您進行全線跟蹤。 :規(guī)格; 96T/48T 小鼠白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA試劑盒廠家 小鼠白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA試劑盒報價
小鼠白三烯B4(LTB4)ELISA試劑盒 :英文名稱; Leukotriene B4,LT-B4 ELISA Kit 購買我公司ELISA試劑盒保證質(zhì)量,靈敏性高、特異性強、重復性好等優(yōu)點已經(jīng)得到廣大客戶的認可,您可放心,且我司有專門的售后部門對您進行全線跟蹤。 :規(guī)格; 96T/48T 小鼠白三烯B4(LTB4)ELISA試劑盒廠家 小鼠白三烯B4(LTB4)ELISA試劑盒報價
小鼠白介素1β (IL-1β)ELISA試劑盒 :英文名稱; Interleukin 1β,IL-1β ELISA Kit 購買我公司ELISA試劑盒保證質(zhì)量,靈敏性高、特異性強、重復性好等優(yōu)點已經(jīng)得到廣大客戶的認可,您可放心,且我司有專門的售后部門對您進行全線跟蹤。 :規(guī)格; 96T/48T 小鼠白介素1β (IL-1β)ELISA試劑盒廠家 小鼠白介素1β (IL-1β)ELISA試劑盒報價
小鼠白介素1(IL-1)ELISA試劑盒 :英文名稱; Interleukin 1,IL-1 ELISA Kit 購買我公司ELISA試劑盒保證質(zhì)量,靈敏性高、特異性強、重復性好等優(yōu)點已經(jīng)得到廣大客戶的認可,您可放心,且我司有專門的售后部門對您進行全線跟蹤。 :規(guī)格; 96T/48T 小鼠白介素1(IL-1)ELISA試劑盒廠家 小鼠白介素1(IL-1)ELISA試劑盒報價
小鼠S100蛋白(S-100)ELISA試劑盒 :英文名稱; Soluble protein-100,S-100 ELISA Kit 購買我公司ELISA試劑盒保證質(zhì)量,靈敏性高、特異性強、重復性好等優(yōu)點已經(jīng)得到廣大客戶的認可,您可放心,且我司有專門的售后部門對您進行全線跟蹤。 :規(guī)格; 96T/48T 小鼠S100蛋白(S-100)ELISA試劑盒廠家 小鼠S100蛋白(S-100)ELISA試劑盒報價
Rosetta-gami B(DE3) 感受態(tài)細胞100ul*10 小鼠可溶性P選擇素(sP-selectin)ELISA試劑盒 :英文名稱; soluble P-selectin,sP-selectin ELISA Kit 購買我公司ELISA試劑盒保證質(zhì)量,靈敏性高、特異性強、重復性好等優(yōu)點已經(jīng)得到廣大客戶的認可,您可放心,且我司有專門的售后部門對您進行全線跟蹤。 :規(guī)格; 96T/48T 小鼠可溶性P選擇素(sP-selectin)ELISA試劑盒廠家 小鼠可溶性P選擇素(sP-