更新時(shí)間:2024-11-22
玉米內(nèi)源基因核酸檢測試劑盒公司相關(guān)產(chǎn)品CD80 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD80 / B7-1 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) -d4Benzocaine-d4美國進(jìn)口CM-H106內(nèi)臟脂肪細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL鹽酸苯達(dá)莫司汀-d5Bendamustine-d5 (major) 美國進(jìn)口MGC803-GFP細(xì)胞,綠色熒光蛋白標(biāo)記胃癌細(xì)胞 成骨肉瘤細(xì)胞,Saos-2細(xì)胞
訂購信息:
產(chǎn)品名稱:玉米內(nèi)源基因核酸檢測試劑盒
規(guī)格:48T 0.1PCR管
編號(hào):BH-P97115
分類:PCR-熒光探針法
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
準(zhǔn)備物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
使用及效果:
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
檢測步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽性對(duì)照),每個(gè)測試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽性對(duì)照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。
CD46 Others Human CD46 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 氧化前胡素()OxypeucedaninHPLC≥98%,
MAO EBV-轉(zhuǎn)化細(xì)胞野百合堿()Crotaline;MonocrotalineHPLC≥98%,
CM-H018成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL野()ScularinHPLC≥98%,
SP2/0, 小鼠骨髓瘤細(xì)胞野黃芩素()SculareinHPLC≥98%,
腎癌Wilms細(xì)胞;G401 大鼠氣管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL8-O-乙酰山梔苷甲酯()8-O-Acetyl shanzhiside methyl esterHPLC≥98%,
小鼠垂體瘤細(xì)胞(分泌促生長激素分泌激素);AtT-20N,N'-二芐基-4,13-二氮雜-18-冠6-(>98.0%(GC)(T))>98.0%(GC)(T)N,N'-Dibenzyl-4,13-diaza-18-crown 6-Ether
ICOS Others Mouse 小鼠 ICOS / AILIM / CD278 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 4,13-二氮雜-18-冠-6-(>98.0%(T))>98.0%(T)4,13-Diaza-18-crown 6-Ether
CNE-2 低分化鼻咽癌細(xì)胞二苯并-30-冠-10-(>97.0%(GC))>97.0%(GC)Dibenzo-30-crown 10-Ether
BxPC-3原位胰腺腺癌細(xì)胞 BxPC-3 in situ pancreatic adenocarcinoma cells 1640+10% FBS4,10-二氮雜-15-冠5-(>96.0%(GC))>96.0%(GC)4,10-Diaza-15-crown 5-Ether
FASLG Protein Human 重組 Fas Ligand / FASLG / CD95L 蛋白 (His 標(biāo)簽)二苯并-15-冠5-(>95.0%(GC))>95.0%(GC)Dibenzo-15-crown 5-Ether
玉米內(nèi)源基因核酸檢測試劑盒SD大鼠骨髓間質(zhì)干細(xì)胞 SD rat bone marrow mesenchymal stem cells1,5-二羥基奈100克
SK-N-SH細(xì)胞,神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞 環(huán)狀芽孢桿菌 前列腺上皮細(xì)胞RNAHPEpiC miRNA5 μg偶氮錄膦mA;2-(4-錄-2-膦醋基本偶氮)-7-(3-?;九嫉?/span>)-1,8-二羌基-3,6-二磺醋 Chlorophosphonczo Mc 86167-87-2
SF767(腦瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 (25%) Glutaraldehyde solution (Grade I, 25% ... 100ML 通用試劑
HCT-15(結(jié)腸癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0394NCI-H2170(肺鱗癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS4B;Vero-HCV-NS4BADPDIwo7ium7iHYDRATE 5'-二嶙酸腺苷二鈉超級(jí)白色結(jié)晶粉末FROZENsigma
鼻咽癌細(xì)胞;CNE-2ZdTTP 100ul Pharmacia