更新時間:2024-11-22
表面膜免疫球蛋白D(mIgD)ELISA Kit相關(guān)產(chǎn)品, 帶His標(biāo)簽THIAZOYLBLUETETRAZOLIUMBROMIDE-MTT噻唑藍(lán)超純級黃色至橙黃色粉末C-DYEsigmaDLL4 ONPG2-硝基苯-α-D-吡喃半乳糖苷1克共軛級,4500u/mg,小牛腸,粉末小鼠 DLL4 TRISTRIS生物技術(shù)級白色結(jié)晶粉末RTsigmaDLL4 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
操作流程:
稀釋——加樣——溫育——配液——洗滌——加酶——溫育——洗滌——顯色——終止——測定
1.有質(zhì)量問題免費包換,合同上注明了的(質(zhì)量問題包括運輸不當(dāng),客戶在使用過程中測不出結(jié)果,等等!)
2.全程技術(shù)指導(dǎo).(包括售前的標(biāo)本收集,使用過程中不明白的地方,實驗結(jié)束后的數(shù)據(jù)分析,有任何疑問,我們技術(shù)都會即時給你去電)
3.提供免費代測的服務(wù)。(你只需把標(biāo)本寄過來,我們?yōu)槟愎?jié)省時間,幫你出結(jié)果,原始數(shù)據(jù),分析數(shù)據(jù)均可提供,一般時間是5天左右)
4.客戶有任何問題,我們都是在一個工作日之內(nèi)給出解決方案。售后和技術(shù)這一塊都是竭誠為客戶服務(wù)!
為什么實驗過程中孵育、洗滌需要振蕩、如何振蕩。
振蕩孵育使反應(yīng)更充分,振蕩洗滌使背景更干凈。建議使用酶標(biāo)96孔微孔板振蕩器。
孵育過程振蕩,可以加快、加強抗原抗體分子間的相互碰撞接觸,使得反應(yīng)過程更加*,OD值通常會比未振蕩孵育的結(jié)果要高;洗滌過程振蕩,可以使洗板更干凈,在很大程度上能降低背景值,同時可以提高試劑盒檢測的靈敏度,具體操作請參見說明書。
產(chǎn)品名稱 | 表面膜免疫球蛋白D(mIgD)ELISA Kit |
英文名稱 | Human surface membrane immunoglobulin D (mIgD) ELISA Kit |
貨號 | BH-G63428 |
試劑和器材:
1. 標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀
2. 高速離心機
3. 電熱恒溫培養(yǎng)箱
4. 干凈的試管和Eppendof管
5. 系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭,一次檢測樣品較多時,用多通道移液器
6. 蒸餾水,容量瓶等
試劑盒組成及試劑配制 :
1.酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔)。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3. 樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶
4. 標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6. 標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
注意事項:
1加樣:
①實驗樣本過多時,可分批次操作,以減少實驗時間延長造成的誤差;
②加酶試劑后,用吸水紙吸干孔外試劑;
③作定量試驗時,使用加樣器加注試劑,并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性,此外,要做到一份樣本一個移液頭,防止交叉污染。
2.溫育:
①如有兩種溫度,盡量使用較低的溫育溫度、較長反應(yīng)時間的條件;
②用1個小溫度計放置在板孔反應(yīng)液中測量觀察;
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會造成“邊緣效應(yīng)”,因此盡量采用水??;
3.洗板:
①手工洗板時,拍板時要垂直,避免交叉污染,用力不能過猛,防止抗原抗體復(fù)合物脫離;
②洗板機洗板時應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢,若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出;
③為了洗滌效果好,實驗室可采用機器與人工洗滌相結(jié)合的方法,在機器洗滌后再進(jìn)行人工洗板1-2次,或適當(dāng)增加洗板的次數(shù);
4.顯色:
ELISA試劑盒中,如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物,則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液;如以鄰苯二胺(OPD)為底物,則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,但A、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械。
5.判定:
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成,定性測定用肉眼判讀試驗結(jié)果時,反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm;定量測定時用酶標(biāo)儀讀取結(jié)果,酶標(biāo)儀不應(yīng)置于陽光或強光照射下,需先預(yù)熱15-30 min再進(jìn)行測試。
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