ELISA試劑盒洗刷在ELISA進程中雖不是一個反響過程,但卻決議著試驗的勝敗。ELSIA試劑盒就是靠洗刷來達到別離游離的和結(jié)合的酶符號物的意圖。經(jīng)過洗刷以鏟除殘留在板孔中沒能與固相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì),以及在反響進程中非特異性地吸附于固相載體的攪擾物質(zhì)。聚苯y(tǒng)i烯等塑料對蛋白質(zhì)的吸附是普遍性的,而在洗刷時應(yīng)把這種非特異性吸附的攪擾物質(zhì)洗刷下來。可以說在ELISA操作中,洗刷是zui主要的關(guān)鍵技術(shù),應(yīng)引起操作者的高度重視,操作者應(yīng)嚴厲按要求洗刷,不得大意。 ELISA試劑盒洗板方法:
1.手藝洗板辦法:按試劑說明書嚴峻操作,稀釋液用蒸餾水按1∶20稀釋濃縮洗液,適量置于臉盆之中。從37℃水浴溫箱中拿出溫浴到時的反響板,到洗刷池處,鋪開自來水約1min,然后快速甩掉反響液,即用自來水沖刷數(shù)次,甩掉水并用潔凈的毛巾吸干,放入配好洗刷液的臉盆之中,浸泡5min~10min,然后將反響板取出,甩掉洗刷液,再用自來水沖刷數(shù)次,用潔凈吸水的毛巾拍干(屢次)反響板。加顯色劑a、b后,振動封板,放入37℃水浴溫箱10min,取出,加間斷液,振動,上酶標儀讀板,查詢作用。按感染性醫(yī)療廢物處理洗刷池的液體及用過的洗刷液:參加健之素(500mg/片),使其濃度抵達2500mg/l,浸泡24h,搜集起來,交醫(yī)療廢物處理公司處理。
洗板機法按試劑說明書嚴峻操作,稀釋液用蒸餾水按1∶20稀釋濃縮洗液,ELISA試劑盒適量置于洗板機洗液瓶里。將反響到時的反響板取出,用洗板機洗板5次,每次浸泡1min,取出,用潔凈的毛巾拍干(屢次)反響板。加顯色劑a、b后,振動封板,放入37℃水浴溫箱10min,取出,加間斷液,振動,上酶標儀讀板,查詢作用。
2.主動洗板:按試劑說明書嚴峻操作,稀釋液用蒸餾水按1∶20稀釋濃縮洗液,適量置于洗板機洗液瓶里。將反響到時的反響板取出,用洗板機洗板5次,每次浸泡1min,取出,用潔凈的毛巾拍干(屢次)反響板。加顯色劑a、b后,振動封板,放入37℃水浴溫箱10min,取出,加間斷液,振動,上酶標儀讀板,查詢作用。
ELISA試劑盒洗板時應(yīng)注意以下問題:
?。?)需每天校正注液量及殘液量,洗滌后殘液量不得大于2μl;
?。?)及時更換破損吸液針,避免破壞底板包被;
(3)針對不同廠家酶標板注意調(diào)整吸液頭下降高度,避免沖洗針頭卡住酶標板;
?。?)注意調(diào)整洗液量,洗液量過多將溢出,過少將達不到洗滌效果;
?。?)關(guān)機前使用蒸餾水沖洗管道,避免洗液的結(jié)晶物堵塞管道;
(6)不同種試劑盒的洗液嚴禁混合使用。
ELISA試劑盒洗板可能碰到的問題有:
1.采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉;
2.采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差;
3.反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。