無(wú)論是對(duì)試驗(yàn)的硬件條件還是對(duì)試驗(yàn)的操作人員的技能要求,ELISA的試驗(yàn)操作所要求的條件是比較嚴(yán)格的,稍有不慎,前功盡棄。 1、如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),請(qǐng)先將樣本稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,核算時(shí)請(qǐng)zui后乘以稀釋倍數(shù)(×5×n)。
2、濃洗刷液或許會(huì)有結(jié)晶分出,ELISA試劑盒稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗刷時(shí)不影響效果。
3、封板膜只限一次性運(yùn)用,以避免交叉污染。
4、各步加樣均應(yīng)運(yùn)用加樣器,并經(jīng)常校正其正確性,以避免實(shí)驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)目多,舉薦運(yùn)用排槍加樣。
5、嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)效果斷定有必要以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
6、從冷躲環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可運(yùn)用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝進(jìn)密封袋中保存。
7、一切樣品,洗刷液和各種廢棄物都應(yīng)按感染物處理。
8、本試劑不同批號(hào)組分不得混用。顯色劑B請(qǐng)避光保存。
9、假設(shè)ELISA試劑盒樣品不立即運(yùn)用,應(yīng)將其分紅小部分-70℃保存,防止重復(fù)冷凍。盡或許的不要運(yùn)用溶血或高血脂血。假設(shè)血清中很多顆粒,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱凍住。應(yīng)在室溫下凍住并確保樣品均勻地充沛凍住。